REGENERACIÓN IN VITRO DE PLANTAS DE F. VESCA A PARTIR DE EXPLANTOS FOLIARES

HAEL CONRAD, VERÓNICA; TOMAS GRAU, RODRIGO; DÍAZ RICCI, JUAN C.

Horco Molle, Tucumán

Jornada; 29º Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal; 2012

Asociación de Biología de Tucumán

En los últimos 20 años se han logrado importantes avances en la ingeniería genética en frutilla, lo que posibilita la incorporación de genes de interés agronómico o académico. Para desarrollar una técnica de transformación genética es fundamental contar con un sistema de regeneración eficiente. Por ello se planteó como objetivo ajustar el sistema de regeneración de plántulas a partir de explantos de hoja y pecíolo. Para este estudio se utilizaron accesiones locales de F. vesca. Se recolectaron frutos en la localidad de Villa Nougués (26° 51′ 0″ S, 65° 22′ 44″ O), se extrajeron los aquenios, se los escarificó con ácido sulfúrico concentrado (cinco minutos) y se sembraron en dos medios de cultivo: MS con sales a la mitad con sacarosa 4% (MS1) y MS con sacarosa 3%, y las hormonas BAP 0,5 mg/l e IBA 0,25 mg/l (MS2) (ambos pH 7,4). Se cultivaron a 25 ± 2°C, fotoperíodo de 16 horas de luz e intensidad de irradiancia de 40 μmoles/m2.s. Al cabo de 4 meses se evaluó el crecimiento y se eligió el medio MS1 ya que dichas plantas presentaron mayor tamaño. A partir de las plantas ?in vitro? de 4 meses de edad  crecidas en MS1 se cortaron secciones de hoja de aproximadamente 4 mm2 y pecíolos de 4 mm de longitud, y se sembraron en medio de regeneración (MS con sacarosa 3%, BAP 3 mg/l e IBA 0,25 mg/l para hojas y BAP 1 mg/l e IBA 0,25 mg/l para pecíolos, pH 5,74). Hojas y pecíolos regeneraron en forma de pequeñas masas de células indiferenciadas llamadas callos, que a medida que crecieron, se diferenciaron en brotes. El 70% de hojas y 50% de pecíolos dieron brotes. Cuando alcanzaron un tamaño aproximado de 5 mm se los separó y sembró en medio MS1. Cuando las plántulas alcanzaron 5 cm de altura y emitieron raíces, se las rusticó en turba estéril, se las mantuvo en una cámara húmeda bajo las condiciones de luz y temperatura antes mencionadas y luego de 1 mes se las colocó en invernadero. Como conclusión, se seleccionó un medio de cultivo adecuado para la germinación in vitro de aquenios de especies silvestres locales de F. vesca, y se ajustó un sistema eficiente de regeneración de plantas a partir de explantos de hoja y pecíolo.