INVESTIGADORES
CORIGLIANO Mariana Georgina
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación de la capacidad inmunogénica de una vacuna novel de tipo DIVA contra la neosporosis en bovinos.
Autor/es:
MENDOZA MORALES, LUISA F; FIORIANI, FRANCO; LAGORIO, VALENTINA; SANCHEZ, EDWIN F; CORIGLIANO, MARIANA G; CIRONE, F; CHEUQUEPAN, F; MALDONADO, J; HECKER, Y; RAMOS DUARTE, ANDRÉS V; CANTÓN, G; MOORE, PRANDO D; CLEMENTE, MARINA; SANDER, VALERIA A
Reunión:
Jornada; XII Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2019
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria
Resumen:
Neospora caninumes el agente etiológico de la neosporosis, una enfermedad infecciosa mundialmentereconocida como la principal causa de abortos y fallas reproductivas enbovinos. Actualmente no existen tratamientos quimioterapéuticos ni vacunascontra la neosporosis. Un abordaje novedoso es el de las vacunas ?DIVA? (delinglés differentiate infected fromvaccinated animals). En un trabajo previo de nuestro laboratoriodemostramos en un modelo murino de neosporosis congénita que la inmunización deratones BALB/c con una formulación vacunal recombinante novel tipo DIVA,conteniendo el Ag de superficie SAG1 de N.caninum (rNcSAG1) y la proteína de choque térmico de 90 kDa de Arabidopsis thaliana (rAtHsp81.2) comoadyuvante, generó no sólo IgG anti-rNcSAG1 sino también IgG anti-rAtHsp81.2, yotorgó protección parcial contra la infección y la transmisión vertical delpatógeno. Teniendo en cuenta estos antecedentes, nos propusimos determinar la capacidad inmunogénica ypropiedad DIVA de la formulación vacunal propuesta en la especie de interés, Bos taurus. Con este propósito, 21 vaquillonas libres de neosporosis fuerondivididas en 6 grupos, a los que se les administró, según correspondiera, 2dosis de cada una de las siguientes formulaciones mediante una inyecciónsubcutánea los 0 y 30 días post inmunización (d.p.i.): (A): 50 mg derNcSAG1 + 150 mg rAtHsp81.2 (n=4); (B): 200 mg derNcSAG1 + 600 mg rAtHsp81.2 (n=4); (C): 500 mg derNcSAG1 + 1500 mg rAtHsp81.2 (n=4);. (D): 150 mgrAtHsp81.2 (n=3); (E):1500 mg g de rAtHsp81.2 (n=3); (F): control vehículo (sólo 3ml de PBS; n=3). Se colectaron muestras de sangre (40 ml) de la vena yugularpara evaluar la respuesta inmune humoral a los 0 (pre-inmune), 30 (pre-boost),45, 60 y 90 d.p.i. Se recuperó el suero, que fue utilizado para realizar ladeterminación del título de IgG anti-rNcSAG1 y anti-rAtHsp81.2 y los isotiposIgG1 e IgG2 anti-rNcSAG1. Por otro lado, con el objetivo de evaluar larespuesta celular se colectó sangre con heparina a los 60 d.p.i. de todos losanimales, a partir de la que se obtuvieron las células mononucleares de sangreperiférica (CMSP), que fueron cultivadas en medio DMEM en presencia/ausenciadel Ag. (rNcSAG1) por 72 hs. Posteriormente se recuperaron los sobrenadantesdel cultivo celular para la determinación de secreción de IFN-g porElisa. Los sueros de los animales que recibieron las dosis media (grupo B) yalta (grupo C) de la formulación vacunal mostraron altos títulos de anticuerposIgG e IgG2 anti-rNcSAG1 desde los 30 d.p.i. en adelante, alcanzando valoresmáximos a los 60 d.p.i. Los animales que recibieron la menor dosis de laformulación vacunal (A) y aquellos correspondientes a los controles de dosis deadyuvante (D y E) o vehículo (F) no mostraron anticuerpos anti-rNcSAG1. No fueposible detectar títulos de IgG1 anti-rNcSAG1 en ninguna de las muestras. Porotro lado, todos los animales a los que se les administró el adyuvante solo (Dy E) o en conjunto con el Ag. (A, B y C) mostraron títulos de IgGanti-rAtHsp81.2, obteniéndose los mayores valores a los 60 d.p.i. para losgrupos que recibieron la mayor dosis de adyuvante (C y E). Respecto de larespuesta inmune celular, la estimulación con el Ag. de las CMSP provenientesde los animales inmunizados con la mayor dosis de la formulación vacunal (C)indujo la secreción de niveles de IFN-g significativamente mayores a los del grupo vehículo(F). En conclusión, la inmunización de vaquillonas con la dosis más alta de laformulación vacunal de tipo DIVA conteniendo el Ag. rNcSAG1 y como adyuvante laproteína rAtHsp81.2 es capaz de generar una importante respuesta inmune humoralcon la secreción de IgG e IgG2 anti- rNcSAG1 e IgG anti-rAtHsp81.2, así comotambién de promover la respuesta inmune celular, mediada por la producción deIFN-g. Estos resultados nos alientan a evaluar su capacidadinmunoprotectora durante la preñez bovina.