Producción de proteínas recombinantes con valor inmunoprotectivo de Toxoplasma gondii en Lactuca sativa L. para el desarrollo de vacunas basadas en plantas

RADONIC, LAURA; SANCHEZ, EDWIN F; DARQUI, F; CORIGLIANO, MARIANA G; LÓPEZ, N; LÓPEZ BILBAO, MARISA; CLEMENTE, MARINA

Bahía Blanca

Congreso; XI Simposio Nacional de Biotecnología REDBIO 2017; 2017

Latoxoplasmosis tiene gran importancia a nivel médico y veterinario ya que causaenfermedades congénitas y abortos tanto en humanos como en animales. Lavacunación contra T. gondii esconsiderada el método más eficiente para prevenir esta enfermedad. Por ello, sepropone desarrollar nuevos sistemas para la producción de antígenos de T. gondii con el fin de producir unavacuna basada en plantas.Porotro lado, la expresión de proteínas en lechuga demostró que esta especie puedeser utilizada como plataformas de producción de bajo costo, con un sistema deentrega conveniente para la producción de vacunas.Eneste trabajo, se realizaron 2 construcciones conteniendo la versión madura dela proteína mayor de superficie (SAG1) de T.gondii fusionada a dos proteínas chaperonas-adyuvantes, las proteínas dechoque térmico (heat shock protein, hsp)de 90 kDa (hsp90.3) de Nicotianabenthamiana y de 81.2 kDa (hsp81.2) de Arabidopsisthaliana. Estas construcciones fueron clonadas en el vector pK7WGR(modificado del vector Gateway pK7WG2 por la incorporación del promotor rbcS1 en lugar del promotor CaMV35S). La transformación genética delechuga (Lactuca sativa L) variedad Grand Rapids se realizó utilizando la cepaLBA4404 de A. tumefaciens. Aquellosbrotes regenerantes que mostraron un desarrollo radicular adecuado en presenciadel agente selectivo se llevaron al invernáculo para su aclimatación ycrecimiento.Lasplantas obtenidas fueron evaluadas por PCR, confirmando la obtención de 2eventos para la construcción hsp81.2-SAG1 y 8 eventos para la construcciónhsp90.3-SAG1. Adicionalmente, se realizó un westernblot de 11 plantas pertenecientes a 4 eventos de la construcciónhsp90.3-SAG1, mostrando la correcta expresión de la proteína en las plantas analizadas.Nuestrosresultados, aunque preliminares, muestran que las plantas de lechuga pueden serefectivamente una plataforma adecuada para la expresión de estos antígenos.