INVESTIGADORES
CORIGLIANO Mariana Georgina
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la optimización de codones y de la localización subcelular en la expresión del antígeno SAG1 de Toxoplasma gondii en hojas de tabaco y análisis de la inmunogenicidad en ratones
Autor/es:
LAGUÍA BECHER MELINA; MARTIN VALENTINA; GOLDMAN ALEJANDRA; CORIGLIANO, MARIANA G; CLEMENTE MARINA
Lugar:
Rosario, Santa Fé
Reunión:
Congreso; II Congreso Internacional-REDBIO-Argentina. VII Simposio Nacional de Biotecnología REDBIO Argentina; 2009
Institución organizadora:
REDBIO Argentina
Resumen:
En este trabajo se analizó el efecto de la optimización de codones y la localización subcelular sobre la expresión transiente del antígeno SAG178-322 de Toxoplasma gondii en hojas de tabaco. Además, se realizaron inmunizaciones intraperitoneal y subcutánea en ratones con extractos vegetales expresando dicho antígeno. Se adecuó la secuencia de SAG178-322 al uso de codones de Nicotiana tabacum y se obtuvieron versiones que permitirían la acumulación de la proteína en el retículo endoplasmático o en el apoplasto. La modificación de 58 nucleótidos que la secuencia que codifican para la proteína SAG178-322 no mejoró la expresión de la misma. Por otro lado, los niveles de expresión de la versión nativa permite la retención de SAG178-322 en el RE fue mayor que las versiones que envían la proteína al apoplasto. Sin embargo, la acumulación de ARNm fue mayor para la versión vegetalizada de retención al RE. En cuanto a los ensayos de inmunización, los ratones inmunizados intraperitonealmente con los extractos vegetales expresando SAG178-322 combinado o no con otros antígenos de T. gondii (GRA4) también expresado en plantas mostraron una reducción significativa de la carga parasitaria cerebral comparada con el grupo control pese a que no se evidenció la generación de una respuesta humoral específica. Sin embargo, en las inmunizaciones subcutáneas con extracto expresando SAG178-322, donde también se había observado inmunoprotección y respuesta humoral, se observó un aumento significativo en el test de hipersensibilidad retardada (DTH) en el grupo inmunizado, sugiriendo la generación de una respuesta celular específica