Localización nuclear del factor forkhead box de clase O FoxO3a (FoxO), su asociación con betacatenina y Smads y la participación de proteínas quinasas, en líneas de Hepatocarcinoma Celular (HCC) tratadas con Interferón alfa (IFN)

CEBALLOS M P; PARODY, JP; QUIROGA A D; CASELLA M; FRANCÉS D E; CARNOVALE C E; ALVAREZ ML; CARRILLO M C

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Previamente demostramos que IFN disminuye la proliferacióne incrementa la apoptosis en líneas de HCC disminuyendo lainteracción betacatenina/TCF4/Smads. En el núcleo, FoxO participaen proliferación y apoptosis e interactúa con betacatenina y Smads.FoxO es inhibido por Akt, IKKß (IKK) y Erk, que promueven susecuestro citosólico, mientras que se acumula en el núcleo trasser fosforilado por JNK y p38MAPK (p38). Evaluamos los efectosde IFN en C3A y Huh7 sobre los niveles proteicos de FoxO totaly fosforilado por Akt, las quinasas vinculadas a FoxO (inmunoblot)y su unión con betacatenina/Smads (co-inmunoprecipitación).Analizamos los niveles génicos y proteicos de genes blanco deFoxO (Real-Time q-PCR e inmunoblot). Estudiamos los nivelesnucleares de FoxO (inmunoblot) en células Huh7 pretratadas coninhibidores de IKK, Erk y p38 y luego estimuladas con IFN. IFNredujo los niveles de FoxO fosforilado en extractos citosólicos(C3A -36%* Huh7 -49%*) y aumentó FoxO total en extractosnucleares (C3A +84%* Huh7 +72%*). IFN disminuyó los nivelesde las formas activas de Akt (C3A -67%* Huh7 -61%*), IKK (C3A-22%* Huh7 -27%*) y Erk (C3A p-Erk1 -79%* p-Erk2 -56%*Huh7 p-Erk1 -46%* p-Erk2 -41%*) mientras que incrementó losniveles de las formas activas de JNK (C3A p-JNK2/3 +49%* p-JNK1 +64%* Huh7 p-JNK2/3 +45%* p-JNK1 +41%*) y p38 (C3A+59%* Huh7 +121%*). La inhibición de IKK y Erk estimuló lalocalización nuclear de FoxO inducida por IFN (+36%* y +45%*respectivamente) mientras que la inhibición de p38 bloqueó estefenómeno (-28%*). IFN aumentó la asociación de FoxO con betacatenina y Smads. La expresión de los genes blanco aumentó significativamente con IFN. *p<0,05. Los resultados indican que eltratamiento con IFN modula las actividades de Akt, IKK, Erk y p38,favoreciendo la acumulación nuclear de FoxO y la disrupción delcomplejo de sobrevida betacatenina/TCF4/Smads. La estimulaciónde ambos eventos podría ser considerada una potencial estrategiafarmacológica para tratar el HCC.