Diseño de análogos con mayor potencial antimicrobiano a partir de la identificación y caracterización de prepropéptidos presentes en la piel de Boana pulchella (Anura: Hylidae)

AGUILAR SILVANA; NATALIA L. CANCELARICH; BASSO, NÉSTOR G.; PÉREZ, LUIS ORLANDO; MARANI, MARIELA MIRTA

Congreso; 1st International Society for Microbial Ecology-Latin American Congress; 2019

Debido a que habitan ambientes húmedos y con una alta densidad de microorganismos, losanfibios secretan en su piel un variado arsenal de péptidos antimicrobianos (PAMs),destinados a evitar la proliferación de patógenos invasores y microorganismos comensales.Estos PAMs presentan un potencial tecnológico en la búsqueda de nuevas herramientasalternativas para combatir microorganismos patógenos pero su aplicabilidad se ve limitadapor su citotoxicidad. Cambios racionales en la estructura primaria podrían maximizar oampliar el rango de actividades biológicas para generar análogos sintéticos terapéuticos,mejorando su capacidad antimicrobiana y manteniendo un balance óptimo entre estabilidady citotoxicidad. En el presente trabajo se identificaron y caracterizaron 5 nuevos prepro-péptidos a partir de la extracción del ARNm, de la piel de Boana pulchella (Bpc), yposterior amplificación, clonación y secuenciación de los DNAc específicos. Los mismospresentaron carga neta positiva, PM entre 1870 y 1996 Da y estructura 3D teórica de tipo α-hélice anfipática, con probabilidades de ser PAMs de hasta 0.92. Sin embargo, también fuealta la predicción de actividad hemolítica (> 0.8). Con el objetivo de mejorar su potencialterapéutico se realizó un exhaustivo análisis de la relación estructura-actividad (SAR)utilizando las herramientas informáticas PEP-FOLD, HeliQuest, ProtParam, CAMPR3,DBAASP y Mutator. Se diseñaron y analizaron análogos in silico obteniendo 7 nuevasestructuras con un mayor espectro de acción (bacterias y hongos) y una disminuciónsignificativa en su actividad hemolítica. Estos péptidos están siendo sintetizados para suposterior purificación y evaluación de su actividad antimicrobiana, hemolítica y citotóxica.