CLONADO Y EXPRESIÓN HETERÓLOGA DE FOSFOLIPASA A2 DE BOTHROPS DIPORUS: INICIO ESTUDIO ESTRUCTURA-ACTIVIDAD

PABLO J. YUNES QUARTINO, JOSÉ L. BARRA, GERARDO D. FIDELIO

Huerta Grande, Córdoba

Jornada; XVII Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2009

Sociedad de Biología de Córdoba

CLONADO Y EXPRESIÓN HETERÓLOGA DEFOSFOLIPASA A2 DE BOTHROPS DIPORUS: INICIOESTUDIO ESTRUCTURA-ACTIVIDADYunes Quartino P.J., Barra J.L., Fidelio G.D. Departamento deQuímica Biológica, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad deNacional de Córdoba. pabloyunes@yahoo.comEl veneno de las víboras (familia viperidae) es una mezcla compleja,en la cual se haya presente invariablemente fosfolipasa A2 secretoria(tipo II). El objetivo del trabajo es conocer la causa de las diferenciasde presiones laterales de monocapas de lípidos en las cuales una u otraisoespecie tiene el máximo de actividad.Se clonaron isoespecies a partir de ARNm de glándula de veneno,usándo la técnica de RT-PCR, para luego expresar una de lasisoespecies en bacterias con marca de histidinas en su N terminal.Luego de purificación y pruebas de renaturalización, esta proteína defusión no presentó actividad en monocapas de dLPC. Por esto se estátratando de expresarla sin aminoácidos extras.Es el primer reporte de clonado y expresión heteróloga de unafosfolipasa A2 de Bothrops diporus, víbora responsable de la mayoríade los accidentes ofídicos en la república Argentina. La causa de laausencia de actividad enzimática se atribuye al artefacto de unextremo N terminal modificado.Agradecimientos: Al Dr. Gerardo Leynaud del Centro de ZoologíaAplicada, FCEFyN, Universidad Nacional de Córdoba.