p-MINFLUX: Nanoscopía de Fluorescencia MINFLUX Pulsada para estudio de dinámica de moléculas individuales

CHOQUE, FLORENCIA D.; LOPEZ, LUCÍA F.; STEFANI, FERNANDO DANIEL

Congreso; XXIII CAFQI - Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química INorgánica; 2023

Las nanoscopías de fluorescencia permiten la visualización óptica con resoluciónespacial más allá del límite de la difracción a partir del control fotoquímico o fotofísicode moléculas fluorescentes.La problemática principal de los métodos existentes es que se ven limitados por elnúmero total de fotones de fluorescencia que una molécula puede emitir. En estepunto se halla la principal fortaleza de la nanoscopía de fluorescencia MINFLUX yaque permite alcanzar resoluciones de 1 - 2 nm (el tamaño molecular de losmarcadores) a partir de tan sólo 1000 fotones. 1 Por su parte, MINFLUX pulsado (p-MINFLUX) es una nueva implementación de MINFLUX con un arreglo experimentalque además de mostrar un buen desempeño, tiene la ventaja de ser más simple que eloriginal ya que utiliza pulsos láser intercalados en el tiempo a la máxima velocidadposible para así consultar la localización de cada molécula marcada. Esto hace de p-MINFLUX una técnica especialmente útil para experimentos de dinámica molecular enla escala de los microsegundos. 2 Recientemente, la configuración original de MINFLUXfue extendida a 3D, obteniendo resolución nanométrica en las tres dimensiones, acostas de una complejidad instrumental muy elevada. Con miras a desarrollar p-MINFLUX en 3D, para lograr superar la barrera de los 10 nm también en el eje axial ycon el fin de observar la organización supramolecular de proteínas estructurales sepresentan resultados preliminares del desempeño de p-MINFLUX en 2D.