Interacción de las P-ATPasas con el citoesqueleto

MARIANELA DALGHI; MARIELA FERREIRA GOMES; IRENE C. MANGIALAVORI; CANDELARIA DE LA FUENTE; LAURA VANAGAS; ROLANDO C. ROSSI; JUAN PABLO F.C. ROSSI

La Plata

Congreso; XXXVII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Biofísica (SAB); 2008

Sociedad Argentina de Biofísica (SAB)

El citoesqueleto es una red de filamentos proteicos que ocupa el interior de todas las células animales y vegetales. Estudios previos de nuestro laboratorio demostraron que al modificar el citoesqueleto de actina con citocalasina D, la actividad de la calcio-ATPasa de membrana plasmática (PMCA) proveniente de preparaciones de membranas aisladas de eritrocitos, mostraba un comportamiento de activación-inhibición debido a la interacción entre la actina y la PMCA. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar el efecto de la actina sobre la PMCA, en distintas condiciones de oligomerización. Para ello se utilizó PMCA purificada, la cual carece de citoesqueleto y actina pura extraída de músculo de conejo. Se realizaron experimentos de co-sedimentación que permitieron evaluar la interacción directa entre ambas proteínas, como así también medidas de actividad Ca 2+ -ATPasa para observar como el agregado de actina modificaba la actividad de la PMCA. Los resultados muestran la unión entre la actina F-filamentosa- actina G o pequeños oligómeros y la PMCA en las condiciones ensayadas, las cuales se corresponden con las empleadas en los experimentos de actividad. La actina G- monomérica- o pequeños oligómeros serían responsables de la activación de la PMCA y la actina F- filamentosa- produciría la inhibición de la PMCA. Este fenómeno parece ser una característica general de las ATPAsas insertas en membranas biológicas, revelando que el citoesqueleto no se restringiría sólo a una función mecánica, sino también a la regulación de la actividad de proteínas de membrana con las cuales interacciona. Con subsidios de CONICET, ANPCYT y UBACYT.