ANÁLISIS DE ADN POR UV-MALDI MS USANDO NORHARMANO COMO MATRIZ. ESTUDIO DEL ASPECTO FOTOQUÍMICO

FRANCO M. CABRERIZO; MAGALÍ PELLON-MAISON; M. PAULA DENOFRIO; MARIA R. GONZALEZ-BARÓ; ROSA ERRA-BALSELLS

San Luis, Argentina

Congreso; XXVI Congreso Argentino de Química; 2006

Una de las aplicaciones analíticas más exitosa de la fotoquímica orgánica es la espectrometría de masa de macromoléculas (analito) donde el proceso de volatilización (desorción)/ionización es inducido por un láser ultravioleta el cual excita electrónicamente a un segundo cuerpo denominado matriz o fotosensibilizador. Esta técnica, denominada UV-MALDI-MS, es una de las herramientas esenciales en proyectos proteomics y glycomics, entre otros. Sin embargo, aun no existe un modelo que explique claramente la reacción fotoquímica que ocurre en la muestra sólida formada por la matriz + analito, lo cual limita fuertemente el uso de esta técnica. Son pocos los compuestos que se han descripto como buenas matrices. Algunos derivados de las β–carbolinas, entre los cuales se encuentra el 9H-Pirido[3,4-b]indol o norharmano (nHo), han demostrado ser matrices UV-MALDI muy eficientes para un gran número de analitos[1-6]. Estudios preliminares efectuados en nuestro grupo muestran que no solamente podrían generarse a partir de ADN y ARN cationes estables sino que en particular se generan eficientemente aniones del tipo [M-H] y [M-2H]. Esto despierta un gran interés en el estudio de los procesos térmicos y fotoquímicos que se inician en la mezcla polinucleótido-matriz fotosensibilizada por la presencia en la misma del nHo.             En el intervalo de pH comprendido entre 2 y 11 el nHo presenta un único equilibrio ácido-base característico (Figura 1). El valor de pKa de este equilibrio es de 7,1. El otro grupo funcional de la molécula, el nitrógeno del anillo indólico, tiene un valor de pKa mayor a 12[7]. Estas dos formas ácido-base presentan diferentes comportamientos fotoquímicos y fotofísicos. El carácter básico del mismo está fuertemente incrementado en el estado electrónico excitado[7].