Germinación in vitro del polen trinucleado de Girasol (Helianthus annuus L.). Formulación de un medio de cultivo.

ASTIZ, V., A.C. FERNÁNDEZ, P. MARINÁNGELI Y L.F. HERNÁNDEZ

La Serena

Congreso; X Congreso Latinoamericano de Botánica; 2010

La mayoríade las plantas que florecen producen polen binucleado; sin embargo las de lafamilia Asteráceas, entre las cuales se encuentra el Girasol (Helianthus annuusL.), producen polen trinucleado. Se sabe que este tipo de polen presentamayores dificultades para germinar in vitro que el binucleado. Por este motivose realizó una combinación factorial con diferentes medios de cultivo variandoel soporte (sólido o líquido), la concentración de sacarosa, PEG6000, ácidobórico y sales de calcio, de manera tal de ajustar la formulación de aquél quepermita la obtención de resultados confiables de germinación. El polen fuetomado a la mañana de las anteras cerradas de flores de plantas de girasolcrecidas a campo. Inmediatamentese probó su viabilidad con la tinción de Alexander obteniendo porcentajespositivos de entre 93 y 98%. El medio de cultivo que mejorresultados produjo fue el líquido, utilizando la técnica de la gota suspendidaen cámara húmeda a 25oC y pH 7.0, conteniendo 15% de PEG6000 y 5% desacarosa como componentes osmóticos, 24 mg/ml Ca(NO3)2 y10 mg/ml H3BO3. Los granos se observaron con microscopioa 20X. Con esta formulación, entre un 35 y 40% de los granos de polengerminaron a la dos horas, desarrollando tubos con una longitud de hasta 10 vecessu diámetro.  Referencias previassugieren que la presencia de PEG en el medio genera un desarrollo superior deltubo polínico debido a que regula la permeabilidad de la membrana plasmática ybrinda estabilidad a la membrana del tubo polínico.