INVESTIGADORES
GIMENEZ Guadalupe
congresos y reuniones científicas
Título:
Trypanosoma cruzi: Generación de anticuerpos antifosfolípidos y neutralizantes de actividad Fosfolipasa A1
Autor/es:
BELAUNZARÁN ML,; LAMMEL EM,; GIMENEZ G; BOTT E; SOLANA ME; ISOLA ELD
Reunión:
Otro; XXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2010
Resumen:
Belaunzarán ML, Lammel EM, Giménez G, Bott E, Solana ME, Isola ELD. Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología, Facultad de Medicina, UBA. paradife@fmed.uba.ar Previamente determinamos en los estadíos infectivos de T. cruzi actividad Fosfolipasa A1 (PLA1) asociada a membrana y secretada. (Belaunzarán ML y col. 2007). En tripomastigotes (Trp) sanguíneos correspondientes las cepas de comportamiento polar RA (virulenta, UDT VI) y K98 (no virulenta, UDT I), obtenidos en el pico de parasitemia (7 y 45 días post-infección, pi, respectivamente), la expresión de la PLA1 fue similar, mientras que su actividad fue significativamente mayor en RA y casi indetectable en K98 (Belaunzarán ML, 2008). Este último hallazgo podría estar asociado al desarrollo de anticuerpos (Acs) neutralizantes de la actividad PLA1 en el caso de K98. La existencia de dichos Acs ya ha sido demostrado en T. brucei (Hambrey PN y col, 1980). Para evaluar esta hipótesis, en el presente trabajo se estudió en primer lugar la actividad PLA1 en Trp K98 obtenidos de cultivo celular a fin de suprimir la acción del sistema inmune, utilizando como sustrato [14C] Fosfatidilcolina (PC). Bajo estas condiciones los mismos presentaron actividad, observándose la hidrólisis de PC con generación de LisoPC. Se analizó luego por Inmunoblot la presencia de Acs anti PLA1 en sueros de ratones infectados con RA y K98 y obtenidos en los respectivos picos de parasitemia, confirmándose la existencia de Acs específicos con valores elevados en los animales infectados con K98 y una respuesta leve o nula para RA. Hemos demostrado además que la PLA1 purificada de T. cruzi induce cambios significativos en el perfil lipídico de la célula huésped, generando ácidos grasos, diacilglicerol y lisofosfolípidos (Belaunzarán ML y col. 2007). Estos últimos podrían quedar expuestos en la membrana celular y estimular al sistema inmune, por lo que analizamos por ELISA la respuesta de Acs anti- fosfatidiletanolamina (PE), lisoPE, PC y lisoPC en sueros de ratones infectados con RA y K98, obtenidos a diferentes tiempos pi. Los resultados obtenidos muestran que en la infección por RA y K98 existe producción de IgM contra los 4 fosfolípidos, siendo para ambas cepas mayores los niveles contra PE y lisoPE, como ha sido reportado en patologías autoinmunes. En todos los casos, los títulos para RA resultaron más elevados que para K98. Se detectó escasa o nula reactividad de IgG en los sueros provenientes de animales infectados con ambas cepas. En resumen, la infección por T. cruzi induce Acs antifosfolípidos y neutralizantes de la actividad PLA1 cuyo papel es relevante explorar. Financiado por UBA.