EMPLEO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE TOXOPLASMA GONDII PARA DIAGNOSTICO DE TOXOPLASMOSIS RECIENTES Y CRÓNICAS EN PERROS DEL DEPARTAMENTO CASEROS, SANTA FE MEDIANTE LA DETECCIÓN DE IgG

GELSOMINA ALLE ; VERÓNICA CÓCERES; PATRICIO ZUBILIAGA; LUCAS ANTONELLI; SERGIO ANGEL; CLAUDIA GABRIELA ECHENIQUE

Mar del Plata Buenos Aires

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2011

Sociedad Argentina de Protozoología

Toxoplasma gondii, es un protozoo ubicuo de los animales de sangre caliente, donde la infección crónica (IC) es frecuente y la infección reciente (IA) raramente es bien diagnosticada. El parásito en animales tiene afinidad selectiva por el tejido muscular y cerebral, con capacidad para persistir crónicamente desde una edad temprana. La detección de anticuerpos IgG permite el diagnóstico de IC o exposición pasada al parásito mientras que IgM e IgA se asocian a reactivación o IA. El objetivo de este estudio fue determinar el valor de los antígenos recombinantes de ToxoplamasgondiirRop2, rSAG1 y rGra7 para diferenciar IA de IC en perros del departamento Caseros, Santa Fe mediante la detección de IgG por la técnica de ELISA. Docentes y alumnos del área salud llevaron a cabo prácticas profesionales solidarias que incluyeron diagnóstico, prevención y control de zoonosis en animales, en el período diciembre de 2010 a marzo del 2011. Se atendieron 131 perros (64 machos y 67 hembras), cuyas edades fueron: menores a 1 año: 12 perros, hasta 5 años: 93 y mayores a 5 años: 26. Se les extrajo sangre y los sueros fueron procesados en Área Parasitología. Fac de Cs. Bioq. y Farm. En el laboratorio de Biología Molecular IIB-INTECH, Chascomús, se realizó la clonación, purificación de rRop2, rSAG1 y rGra7, expresados en una cepa M15 de Escherichiacoli y purificados en condiciones no desnaturalizantes en columnas de ácido nitrilotriacético- Ni2+ Para ELISA se sensibilizaron placas de fondo plano con rRop2, rSAG1, y rGRA7 en una concentración de 5 μg/ml por pocillo, durante 18 hs. Los sueros se utilizaron en una dilución 1/100. El anticuerpo secundario (anti-IgG de perro) marcado con peroxidasa se empleó en una dilución 1/5000. Para la reacción de color se agregó el sustrato (mezcla de H2O2, buffer citrato y tetrametilbencidina, en HCl). Se detuvo la reacción con H2SO4 y se midió la densidad óptica a 490 nm, eligiendo 0.300 (límite de corte). Sobre 131 sueros analizados 25 presentaron anticuerpos para dicho parásito (19%), 15 correspondieron a IC y 10 a IA. No se encontraron diferencias significativas con respecto al sexo, pero sí con respecto a la edad, el grupo de perros mayores a 5 años, tuvo mayor número de sueros positivos, p<0.05. rRop2 presentó la mayor sensibilidad tanto para IC (53%) como para IA (67%), mientras que rSAG1 para IC (41%) y rGRA7 por IA (38%). El empleo de estos antígenos recombinantes puede ser utilizado para distinguir infecciones crónicas de recientes que se correlacionan con la clínica observada en los perros.