Capilares revestidos con nanopartículas de oro para análisis de péptidos y proteínas en electrocromatografía capilar

MARIANA HAMER; ANGEL YONE; IRENE REZZANO

Villa Carlos Paz, Córdoba, Argentina.

Encuentro; Nanocórdoba 2012; 2012

La interacción de los péptidos y proteínas con superficies de oro ha sido estudiada en el contexto de la química biomimética. Estas biomoléculas contienen grupos tiol (SH) o amino (NH2) que se pueden adsorber espontáneamente sobre la superficie metálica a través de uniones no covalentes, tales como interacciones electrostáticas e hidrófobas, enlace puente de hidrógeno y apilamiento π-π. Por esta razón, la movilidad electroforética de péptidos y proteínas resulta alterada significativamente por la presencia de nanopartículas de oro (NpAu) mejorando la separación y tiempo de análisis. En este trabajo presenta un nuevo método de inmovilización de nanopartículas de oro en un capilar de sílice fundida. El capilar modificado resultante se utilizó en la separación de ciertos solutos seleccionados. La inmovilización de NpAu en la pared capilar se realizó de manera muy sencilla y rápida sin necesidad de calentamiento. La superficie de la columna capilar recubierta con NpAu se caracterizó por microscopia electrónica de barrido y las propiedades cromatográficas de estos capilares se evaluaron a través de la variación del pH de las soluciones tampón y el voltaje aplicado en la separación. Se obtuvieron separaciones más eficaces de mezclas de péptidos sintéticos utilizando los capilares revestidos con NpAu, duplicándose el factor de capacidad. También se evaluó el perfil electroforético de una mezcla compleja de fragmentos de péptidos trípticos de la HSA (albúmina sérica humana) con el capilar modificado y con el capilar desnudo obteniendo el mejor perfil electroforético en el primer caso. Este método muestra una notable estabilidad, el capilar modificado se reutilizó cerca de 900 veces, que lo hace aplicable a una amplia gama de separaciones analíticas.