DNA satélite em Urvillea chacoensis Hunz. (paullinieae, Sapindaceae): isolamento, caracterização e hibridação in situ fluorescente

URDAMPILLETA, J. D.; PEREIRA DE SOUZA, ANETE; FORNI MARTINS, E. R.; S SCHNEIDER, DILAIDE R; VANZELA, A. L. L; FERRUCCI, M. S.

Foz do Iguaçu

Congreso; 52º Congresso Brasileiro de Genética, 12º Congrso de la Asociacion de la Sociedad Latinoamericana de Genetica; 2006

O gênero Urvillea Kunth pertence à tribo Paullinieae (Sapindaceae), e conta com 17 espécies distribuídas na América, desde Estados Unidos até a Argentina. Este gênero é considerado um dos mais derivados da tribo. Apomorfias neste gênero são encontradas em caracteres morfológicos, palinológicos e citológicos (tanto no número como estrutura cariotípica), que confirmam o estado filogeneticamente derivado de Urvillea em relação aos outros gêneros de Paullinieae. Neste trabalho são apresentados alguns aspectos citológicos e moleculares da estrutura do cariótipo, analisando o padrão de bandas em relação ao padrão de distribuição do DNA satélite de U. chacoensis Hunz. Esta espécie apresenta 2n = 2x = 22, o menor número cromossômico reportado para o gênero, e o bandamento C-Giemsa e DAPI destaca a presença de blocos heterocromáticos ricos em AT ocorrendo preferencialmente nas regiões terminais na maioria de seus cromossomos. Mediante isolamento de DNA genômico e digestão com as enzimas de restrição HindIII e XbaI, foram identificadas bandas de DNA altamente repetitivo. Segmentos de aproximadamente 750 pb foram isolados, purificados e clonados no plasmídeo pBluescript® II KS. Vários clones foram obtidos, os quais foram utilizados para fabricação de sondas para hibridação in situ fluorescente. O seqüenciamento destes clones confirmou o tamanho do monômero, destacando a alta proporção de bases AT. As seqüências de DNA satélite isoladas com HindIII e XbaI são semelhantes e correspondem a monômeros que contém sítios de restrição para ambas as enzimas. Os resultados do FISH demonstram que estas seqüências estão localizadas preferencialmente nas regiões terminais da maioria dos cromossomos e nas regiões condensadas do núcleo na interfase. A marcação pelo FISH demonstrou que estes monômeros de DNA altamente repetitivo ocorrem em tandem e formam parte dos blocos de heterocromatina observados mediante as técnicas de bandamento cromossômico, correspondendo às bandas C-DAPI+. A localização preferencial nas extremidades cromossômicas sugere eventos de acumulação e homogeneização dessas seqüências, o qual poderia ser favorecido por alguma função na estabilização do cariótipo de U. chacoensis, principalmente as regiões cromossômicas terminais. Por outro lado, este trabalho destaca que os estudos de DNA satélite nesta e outras espécies afins poderiam fornecer importantes ferramentas úteis para esclarecer alguns aspectos filogenéticos em Urvillea e conseqüentemente em Sapindaceae