INVESTIGADORES
PIECKENSTAIN Fernando Luis
congresos y reuniones científicas
Título:
Metabolismo de las poliaminas en Avena sativa sometida a estrés salino
Autor/es:
SÁNCHEZ D; A D'ANTUONO, FL PIECKENSTAIN, C BORTOLOTTI, T ALTABELLA, OA. RUIZ
Lugar:
Mendoza, Argentina
Reunión:
Congreso; XXXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular; 1999
Resumen:
La síntesis de Putrescina (Pu) en plantas superiores es catalizada por dos enzimas limitantes, la arginina descarboxilasa (ADC) y la ornitina descarboxilasa (ODC). A su vez, la producción de espermidina (Espd) y espermina (Espm) requiere de otra enzima limitante denominada S-adenosilmetionina descarboxilasa (SAMDc). La ADC es activa en células en diferenciación y/o sometidas a diversas condiciones de estrés. Por su parte, la actividad ODC está asociada con la división celular. En plantas, diversos tipos de estrés son acompañados por un incremento de Pu atribuido a la síntesis de novo de ADC. Recientes trabajos revelan la existencia de dos o más copias de la ADC, algunas de las cuales están reguladas por estrés y otras no. En nuestro trabajo, plántulas de avena de nueve días fueron sometidas a estrés salino (0-200 mM NaCl) y las actividades de ADC, ODC y SAMDc fueron analizadas. Observamos un fuerte incremento de ADC a las 6 horas seguido por una activación bifásica de SAMDc. La actividad de ODC se mantuvo invariable. Dichas actividades se corresponden con incrementos secuenciales de los niveles de Pu y Espd. Interesantemente, el análisis por Western Blot haciendo uso de un anticuerpo monoclonal ‘site-directed’ contra el extremo C-terminal de la secuencia publicada de la ADC de avena nos ha revelado la existencia de al menos cinco formas moleculares distintas por filtración molecular, y corroboradas por ELISA, actividad e inhibición de la misma por alfa-difluorometilarginina (DFMA) y D-arginina. Dichas fracciones presentan variaciones en su constante de afinidad y pesos moleculares de 195, 115, 66, 38 y 22,5 KDa. Su existencia podría explicar, al menos en parte, las discrepancias observadas en otros sistemas entre actividad enzimática y mRNA. Actualmente, nos encontramos analizando la posible existencia de mas de una copia de ADC en avena