Sobrevida al secado y conservación de bacterias lácticas (BL) microencapsuladas con potencial aplicación en el tracto reproductor bovino (TRB)

CORREA BRITO, L.M.; PASTERIS, S.E.; NADER-MACÍAS, M.E.; OTERO, M. C.

Santa Fe

Congreso; III Congreso de Bioquímicos del Litoral, XVI Jornadas Argentinas de Microbiología; 2015

Colegio de Bioquímicos del Litoral, Asociación Argentinas de Microbiología

Se ha estudiadola aplicación de BL benéficas autóctonas del TRB para prevenir la metritis que afectala performance reproductiva de las hembras. Las BL incluidas en una formulaciónveterinaria deben permanecer viables en la matriz del producto y en la mucosadel TRB. La  microencapsulación de BL enun polímero bioadhesivo aseguraría su mayor permanencia en el TRB. Asimismo sepropuso que esta metodología puede proteger la viabilidad y conservación depropiedades benéficas de BL a diferentes condiciones de estrés. En este trabajo se evaluó la sobrevidaal secado y conservación, así como la actividad antimicrobiana de Lactobacillus gasseri CRL1412, 1421, 1460 y L. delbrueckii subsp.delbrueckii CRL1461,  microencapsulados en unamatriz polimérica de alginato obtenida por Emulsión-Gelificacion iónica. Lasmicrocápsulas se lavaron con agua destilada estéril (ADE), resuspendieron enADE y leche descremada al 6% (LD), fraccionaron, liofilizaron y conservaron a 4°C, 30 días.Se definieron unFactor de Sobrevida a la liofilización: FSL= 1-[(LogUFC preliof- LogUFCpostliof)/LogUFC preliof] y a la conservación: FSc= 1-[(LogUFCt0- LogUFCt30)/LogUFCt0]. La carga de las microcápsulas se determinó previadisolución en PBS pH 6,8 (1h, 37⁰C, 75 opm) y cultivo en agar MRS pH 5,5.Se determinó la actividad antagónica de las cápsulascargadas con L. gasseri CRL1412 (~104UFC/mL) mediante co-cultivos con 5x102 UFC/mL de E. coli 99/14 (aislada de metritisbovina).Los FSL y FSc se analizaroncon un diseño factorial considerando los factores (cepa y medio de suspensión delas cápsulas a liofilizar) y su interacción. El ANOVA para FSL (R2=0,97; N= 16) indica que varió (p<0,0001)según la BL; a su vez este comportamiento estuvo condicionado al medio (interacciónsignificativa cepa x medio, p<0,0001).La comparación de los valores de FSL obtenidos para cada cepa entodas las condiciones ensayadas, indica que CRL1461 fue la más resistente alsecado (FSL= 0,84±0,03) (p<0,05,test de Fisher). Los FSL óptimos (comprendidos entre 0,92±0,04 y0,70±0,04) se obtuvieron para las cápsulas cargadas con cualquiera de las cepasresuspendidas en LD y para las cápsulas cargadas con CRL1461 y CRL1412resuspendidas en ADE. El FSc (R2= 0,99; N= 16) varió con la cepa yel medio (p<0,0001), siendo CRL1460la más sensible (FSc= 0,50±0,03; p<0,05).Las BL encapsuladas y liofilizadas en ADE fueron significativamente mássensibles a las liofilizadas en LD, lo que puedo deberse al aw de los liofilizados(agua 0,64±0,06; leche 0,42±0,06). Con respecto a la actividad antagónica, se observó unareducción significativa (LSD Fisher, α=0,05) en la viabilidad de E. coli en co-cultivos con cápsulascargadas, comparada con los de cápsulas vacías y con el control del patógeno.La máxima inhibición se observó a las 12h, con valores de viabilidad de 1,65±0,72log UFC/mL (2,35±0,72 en t=0), mientras que la BL incrementó de 4,93±0,36 a6,03±0,36 unidades log.Los resultados obtenidos indican que laliofilización y conservación a 4°C de las microcápsulas de las BL seleccionadas,representa una alternativa para el mantenimiento de la viabilidad y propiedadesbenéficas de BL de potencial aplicación en el TRB.