Estudio y aplicación de biocatalizadores de CALB en SiO2

CARLOS R. LLERENA SUSTER; MATÍAS DÍAZ; PABLO GIACCIO; SUSANA MORCELLE DEL VALLE; LAURA E. BRIAND

La Plata

Jornada; IV Jornadas de Ciencias Aplicadas ?Dr. Jorge J. Ronco?; 2017

En el presente trabajo se prepararon biocatalizadores por adsorción simple de la lipasa B de Candida antarctica (CALB) sobre nanopartículas de dióxido de silicio. Los mismos fueron usados en la esterificación enantioselectiva de ibuprofeno con etanol.Se estudió la adsorción de la lipasa a partir de distintas soluciones de un extracto crudo en concentraciones iniciales entre 0,5 y 2 mg/mL de proteínas hasta las 2 hs. La máxima cantidad alcanzada de proteínas adsorbidas fue de alrededor de 0,025 µmoles CALB/m2 SiO2 (250 mg/g de soporte) y se obtuvo en menos de 30 minutos de inmovilización. Mediante electroforesis desnaturalizante, se determinó que existió una adsorción selectiva de la CALB con respecto a otras proteínas del extracto enzimático. Los biocatalizadores se utilizaron para esterificar ibuprofeno con etanol en isooctano como co-solvente. Para evaluar la actividad se determinaron los porcentajes de conversión (%X) del ibuprofeno y los excesos enantioméricos (eeS%) hacia el S(+)-ibuprofeno. La actividad a las 24 hs. aumentó cuando la carga proteica en el SiO2 fue mayor hasta un valor de 200 mg/g. En esas condiciones se logró una conversión del 70% y un eeS% de 58%. Los biocatalizadores preparados sólo perdieron entre 7 y 25% de su actividad después de más de siete meses de almacenamiento a 4ºC. Cuando la carga fue superior a 210 mg por gramo de soporte la pérdida fue menor al 10%. El %X y ees% obtenidos con el biocatalizador preparado fueron cercanos al doble de los obtenidos con Novozym ® 435.