Peptidasas Cisteínicas presentes en el látex de Carica quercifolia (St. Hil.) Hieron (Caricaceae)

TORRES, M.J.; LLERENA SUSTER, C.R.; ROIC, L.; LOPEZ, L.M.I.; NATALUCCI, C.L.

Rosario

Jornada; XXX Jornadas Argentinas de Botánica; 2005

Sociedad Argentina de Botánica

Frutos de Carica quercifolia fuero recolectados en diciembre de 2004 en la sierra de Guasayán (distrito serrano del parque chaqueño), provincia de Santiago del Estero, y remitidos inmediatamente al LIPROVE. El látex fue obtenido realizando incisiones superficiales y recibido en buffer cítrico-citrato 0,1M de pH 5,6 conteniendo EDTA 5mM. La preparación fue centrifugada a 11500g durante 20 min obteniéndose un sobrenadante límpido (extracto crudo). Dicho extracto fue caracterizado por SDS-PAGE e isoelectroenfoque-zimograma revelando la presencia de varias fracciones proteicas básicas con alta actividad peptidásica y otras fracciones ácidas no activas. El perfil de pH mostró que la actividad se manifiesta en un amplio rango de pH (más del 80% de actividad máxima entre 6,85 y 9,1). La actividad enzimática fue inhibida por E64 y ácido iodoacético, pero no fue afectada por 1-10 fenantrolina, pepstatina ni PMFS, demostrando que estas peptidasas son cisteínicas. El extracto crudo fue purificado por FPLC utilizando un intercambiador catiónico (CM- Sepharose FF) y buffer Tris-HCl