INVESTIGADORES
GOMEZ Gabriela Elena
congresos y reuniones científicas
Título:
Una aproximación fotoquímica al análisis de la conformación e interfaces proteicas
Autor/es:
MUNDO, M.R.; GÓMEZ, G.E; DELFINO, J.M
Lugar:
Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA. CABA.
Reunión:
Jornada; 153 Jornada Científica de la Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica: Herramientas modernas para el estudio de aspectos estructurales de péptidos y proteínas; 2009
Resumen:
El estado conformacional proteico está ligado a un grado
definido de área superficial accesible al solvente (SASA). Es difícil
establecer con precisión su extensión para cualquier estado conformacional
distinto del estado nativo y no existe ninguna técnica que permita su medición
experimental directa. Hemos abordado su estudio a través de una nueva
aproximación experimental basada en la reacción de diazirina (DZN) con la
cadena polipeptídica. Por irradiación UV, genera metilén carbeno, que reacciona
instantánea e inespecíficamente con su celda molecular inmediata, insertándose
aún en uniones C-H. 3H-DZN ha sido utilizada en nuestro laboratorio en el
estudio del plegamiento de proteínas (1-3) y en la identificación de
superficies de interacción entre proteínas (4), obteniéndose una medida
experimental del SASA. Una alternativa analítica, es la detección por
espectrometría de masa (ESI-MS) de los productos M+n*14 originados por la
metilación de la cadena polipeptídica. Luego de demostrar la utilidad de dicho
método para monitorear transiciones conformacionales en proteínas, nuestro
interés se ha focalizado en la marcación de péptidos (complejo calmodulina-melitina),
lo que posibilitará la identificación y análisis más detallado de la zona de la
proteína marcada. La fotomarcación de proteínas y péptidos con DZN constituye
una nueva aplicación de ESI-MS al análisis conformacional de proteínas y al
mapeo de interfases entre dominios proteicos involucrados en la formación de
complejos.