Modulación de la actividad biológica de macrófagos hepáticos tras el trasplante de células estromales mesenquimales sobre-expresando el factor de crecimiento símil insulina-I en la fibrosis hepática

FIORE EJ; PEIXOTO E; MALVICINI M; BAYO J; ATORRASAGASTI C; RODRÍGUEZ M; SIERRA R; GOMEZ BUSTILLO S; GARCIA M; AQUINO JB; MAZZOLINI G

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC). Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2015

SAIC y SAFIS

Los macrófagos (Mø) hepáticos cumplen un rol importante tanto en la fibrogénesis como en la reversión de la fibrosis hepática. La capacidad de las células mesenquimales estromales (MSC) de migrar selectivamente hacia sitios de injuria permitiría utilizarlas como vehículo de genes terapéuticos. Anteriormente demostramos que la aplicación sistémica de MSC sobre-expresando el factor decrecimiento símil insulina-1, mediante un vector adenoviral (AdIGF-I- MSC) tiene un efecto inhibidor sobre la fibrosis hepática mediado por una reducción en la activación de las células estrelladas hepáticas y el estímulo de la regeneración hepatocitaria. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto sobre los Mø hepáticos tras la administración de AdIGF-I-MSC en un modelo de fibrosis hepática murino generado mediante aplicación crónica de tioacetamida. Las MSC provenientes de médula ósea de ratones Balb/C fueron infectadas con AdIGF-1- MSCs o un adenovirus control que expresa GFP (Green Fluorescent Protein; AdGFP-MSC). Tras 6 semanas de inducción de la fibrosis, se aplicó el tratamiento experimental (AdIGF-I-MSC o AdGFP-MSC) o vehículo y 24 horas después se aislaron los Mø hepáticos para el análisis de su fenotipo, mediante qPCR y ELISA.Asimismo, se tomaron muestras de hígado para estudios de inmunofluorescencia y se evaluó el efecto del sobrenadante de las AdIGF-I-MSC sobre Mø peritoneales. La aplicación de AdIGF-I-MSC no resultó en cambios significativos en el número total de Mø hepáticos, aunque indujo un mayor reclutamiento de los mismos en ellobulillo hepático a expensas de su presencia en los septos de fibrosis. Asimismo, se redujo la expresión de iNOS, TGF-b, TNF-a, IL1b, IL6 e IL12 mientras que aumentó la expresión de Arginasa-1 e IL10 en los Mø hepáticos aislados a partir de animales tratados con AdIGF-I-MSC. Además, la incubación de Mø peritoneales con el sobrenadante de AdIGF-I-MSC incrementó su producción de IL10 y consistentemente redujo sus niveles de producción de IL6. Nuestros resultados sugieren que el efecto de la terapia génica y celular con AdIGF-I-MSC sobre la fibrósis hepática se relaciona, en parte, con la modulación de los Møhepáticos hacia un perfil de tipo antifibrótico/ regenerativo.