Células tumorales transfectadas con el gen del inhibidor secretorio de proteasas leucocitarias (SLPI) median un efecto antitumoral a través de la inducción de apoptosis

COSTA MARIA JULIETA; AMIANO NICOLAS; GUERRIERI DIEGO; REITERI MACARENA; VILLALONGA XIMENA; SANCHEZ MERCEDES; CHULUYAN EDUARDO

La Falda, Córdoba,Argentina

Congreso; LVI Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Inmunologia; 2008

SAI

En resultados previos obtenidos en nuestro laboratorio (Medicina Vol 67, Supl. II 2007, pág. 256) demostramos que la administración del clon 2C1 (línea celular murina de adenocarcinoma mamario transfectada con el gen del SLPI), a ratones BALB/c no producen tumores, a diferencia del clon transfectado con el plásmido vacío (F3II control). En cambio, el clon 2C1 genera tumores si los ratones BALB/c son depletados de neutrófilos. El objetivo del presente trabajo fue profundizar el estudio sobre los mecanismos de acción del SLPI en la progresión tumoral, examinando la capacidad pro-apoptótica del SLPI sobre las F3II. Se determinó la apoptosis temprana y tardía por marcación con Anexina y Ioduro de propidio. La incubación de las células F3II con diferentes concentraciones de SLPI a distintos tiempos, no indujo la apoptosis de estas células. Luego se estudió la capacidad de inducción de apoptosis del plasma de los ratones inoculados con 2C1. Para lo cual, se obtuvo el plasma de los ratones a los dos o siete días posterior a la inoculación de 0,8x106 células de 2C1 y se procedió a la incubación con células 2C1. Los resultados muestran que el plasma de los ratones inoculados con 2C1, pero no los controles, inducen la apoptosis temprana y tardía de las células 2C1, siendo mayor el efecto del plasma obtenido a los 7 días (ver tabla).El siguiente paso, fue examinar si el efecto pro-apoptótico de las células hiperproductoras de SLPI, se podría remedar in vitro utilizando líneas celulares humanas en presencia o ausencia de polimorfonucleares (PMN) obtenidos de sangre periférica. La co-incubación de los PMN con las células tumorales se realizó en cámaras de Boyden modificadas, de tal manera impedir la interacción célula-célula. El tratamiento de las células MDA MB 231 (carcinoma mamario) y A549 (carcinoma de pulmón) con SLPI no indujo la apoptosis directa de las líneas celulares. Sin embargo, los PMN indujeron un aumento de la apoptosis de las MDA MB231(21%) y de la línea A549(83%), la cual fue inhibida por el SLPI(35% y 32% respectivamente). Estos resultados sugieren: i) que el efecto antitumoral de las células 2C1 es mediado en parte por la apoptosis inducida por factores presentes en el plasma de ratones inoculados con la línea 2C1; y ii) que este mecanismo apoptótico no pudo ser remedado en un modelo humano in vitro, al menos para las líneas examinadas.