SLPI: un nuevo receptor de reconocimiento de patrones soluble

GOMEZ SONIA; PASQUINELLI VIRGINIA; GUERRIERI DIEGO; TATEOSIAN NANCY; AMIANO NICOLAS; MAFFIA PAULO; CIALLELLA L; MUSELLA R; ABBATE E; CHULUYAN EDUARDO; GARCIA VERONICA

La Falda, Córdoba,Argentina

Congreso; LVI Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Inmunologia; 2008

Sociedad Argentina de Inmunologia

El inhibidor secretorio de proteasas leucocitaria (SLPI) es un inhibidor de proteasas producido principalmente por células epiteliales.  Previamente demostramos que el SLPI  posee actividad bactericida sobre Mycobacterium tuberculosis.  El objetivo del presente trabajo fue determinar si el SLPI podría actuar como receptor de reconocimiento de patrones para micobacterias. Resultados previos también mostraron que el SLPI se pegaba a la superficie de Mycobacterium bovis- BCG. Sin embargo, desconocíamos si el SLPI se podía unir a cepas virulentas de micobacterias.  Inicialmente determinamos la presencia de SLPI sobre la superficie de cepas de M. tuberculosis  virulentas obtenidas de pacientes con tuberculosis activa.  Para esto, preparados de esputos de pacientes con tuberculosis fueron incubados con un anticuerpo anti-SLPI y luego con un anticuerpo marcado con isotiocianato de fluoresceína (FITC).  El análisis microscópico demostró que las micobacterias de los esputos de los pacientes presentaban SLPI sobre ellas.  Posteriormente, a fin de identificar el patrón molecular asociado a micobacterias reconocido por el SLPI,  realizamos un ensayo de unión in vitro del SLPI a distintas fracciones de la pared de micobacteras. Los resultados mostraron que el SLPI se une principalmente a ManLan (p<0.01) y PIM (p<0.05), pero no a ac. micólico o a la lipoproteína 19Kda.  Asimismo, demostramos que la fagocitosis de las cepas M. bovis- BCG y M. tuberculosis H37Rv pre-tratadas con SLPI por células THP-1 y macrófagos alveolares murinos fue significativamente mayor comparada con las cepas no tratadas con SLPI.  Más aún, la administración intranasal de SLPI a ratones BALB/c al día siguiente de la instilación de M. bovis- BCG, mostró una marcada disminución del número de bacterias a nivel pulmonar comparada con los animales que recibieron sólo M. bovis-BCG (M. bovis-BCG, UFC (x103/pulmón): 1207± 229; M. bovis-BCG +SLPI, UFC (x103/pulmón): 15±7; p < 0.001), así como un mayor porcentaje de fagocitosis, lo cual se evidenció por el mayor número de macrófagos infectados con M. bovis-BCG en  lavados broncoalveolares (%macrófagos infectados: M. bovis-BCG:56.3±10.7;  M. bovis-BCG +SLPI: 83.3±5.5; p< 0.01).  En conjunto estos resultados demuestran por primera vez que el SLPI es un receptor de reconocimiento de patrones soluble que se asocia a micobacterias.