INVESTIGADORES
GUERRIERI Diego
congresos y reuniones científicas
Título:
Un nuevo factor nefroprotector mejora la recelularización de matrices renales
Autor/es:
GUERRIERI DIEGO; HAEUBLEIN G; UVA PABLO; AMBROSI NELLA; FRAUNHOFFER N; CARO FIORELLA; SANCHEZ F; TONIOLO FERNANDA; FIORETTI S; TRUNZO L; TANUS E; BACQUÉ M.C; INCARDONA CLAUDIO; CASADEI DOMINGO; CHULUYAN EDUARDO
Lugar:
MONTEVIDEO
Reunión:
Congreso; XXIV Congreso Latinonoamericano y del Caribe de Trasplante; 2017
Institución organizadora:
STALYC
Resumen:
La decelularización de los órganos produce matrices acelulares, que pueden ser sembrados con diferentes tipos celulares. La repoblación exitosa actualmente es el principal desafío en el campo de la ingeniería de órganos y la medicina regenerativa. El objetivo del presente trabajo es mejorar la recelularización de las matrices renales mediante el uso de agentes nefroprotectores. Anteriormente se observó que una serpina denominada SLPI (inhibidor secretorio de proteinasas leucocitaria) redujo la actividad nefrotóxica inducida por gentamicina y las lesiones inducidas en un modelo murino de daño por isquemia/reperfusión. Dado que la línea de células epiteliales renales humanas HK-2 se utiliza para recelularizar los andamios de riñón, probamos la actividad nefrotectora de SLPI sobre estas células in vitro. El efecto de citotoxicidad se midió usando ensayos de MTT y anexina V/yoduro de propidio. La incubación de HK-2 con altas concentraciones de FK506 indujo citotóxicidad que se redujo al tratar las células con 4 y 0,4 μg/ml de SLPI. Mediante el uso de un microarreglo determinamos que el efecto protector del SLPI estaba mediado por la disminución de mediadores vinculados con muerte celular, hipoxia, respuesta inflamatoria y estrés osmótico, aumentando notablemente las proteínas de choque térmico y su receptor TLR4. Además, SLPI fue capaz de inducir la proliferación de las células HK-2 durante 24 h de cultivo y logró una mejor recuperación en un modelo de cicatrización de heridas al lograr una mayor cobertura de la superficie dañada en comparación con las células no tratadas. Con estos resultados, se procedió a recelularizar una matriz renal de rata con células HK-2 por el uréter, observándose un mayor porcentaje de células adheridas a la matriz cuando las células fueron administradas junto con SLPI (4 μg/ml). Además, el análisis histológico del andamio mostró (a las 24 h) mayor cantidad de células que se unen a los túbulos renales. En general, estos resultados confirman los efectos nefrotectores de SLPI, y avalan su utilización en el proceso de recelularización de las matrices renales con el objeto de generar órganos bioartificiales.