ESTUDIO DE LA REGULACIÓN DEL ONCOGEN RSPO3 EN GLÁNDULA MAMARIA. PARTICIPACIÓN LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN RUNX1 Y FOXP3

ESTEBAN NICOLAS GRASSO; MARIA NOEL ZIMBERLIN; LUCIO CASTILLA; EDITH KORDON; NATALIA RUBINSTEIN

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual SAIC 2008; 2008

Sociedad Agentina de Investigacion Clinica, SAIC

En nuestro laboratorio estamos investigando los mecanismos de regulación de un nuevo oncogen, RSPO3, perteneciente a la familia de proteínas R-spondin. Este factor es capaz de inducir tumorigénesis en células epiteliales mamarias normales y está altamente expresado en tumores de mama. El análisis de la secuencia promotora de RSPO3 reveló la presencia de sitios putativos de unión para el factor de transcripción Runx1. Este factor es fundamental durante la inducción de leucemia. Por otro lado, Foxp3 ha sido descripto como supresor de tumores de mama al inhibir directamente la expresión de oncogenes. Las células epiteliales mamarias normales expresan altos niveles de Foxp3 comparado con células tumorales. A su vez, en un contexto fisiológico, Foxp3 inhibe la actividad de Runx1 a través del contacto proteína-proteína. No hay sitios de unión para Foxp3 en el promotor de RSPO3. El objetivo del presente proyecto consiste en estudiar la participación de los factores de transcripción Runx1 y Foxp3 en la regulación RSPO3 en la glándula mamaria. Elegimos SCP2 como línea de mama normal y LM3 como línea de mama tumoral. LM3 expresó altos niveles de mRNA de RSPO3 comparado con SCP2. El estudio de niveles de mRNA y proteína develó niveles similares de Runx1 en ambas líneas, mientras que Foxp3 se encontró altamente expresado en SCP2 comparado con LM3. Ensayos de gel shift demostraron una marcada disponibilidad de Runx1 para unirse a una sonda del promotor de RSPO3 conteniendo un sitio de unión para este factor dentro. Esta unión fue marcadamente más intensa en LM3 que en SCP2. Esta diferencia podría deberse a la presencia de altos niveles de Foxp3 en SCP2. La utilización de sonda fría y de anticuerpo específico contra Runx1 evidenció la especificidad de la unión entre Runx1 y la región promotora de RSPO3. Este estudio nos permite seguir adelante en la evaluación de la participación de Runx1 y Foxp3 en la regulación de la expresión de RSPO3 en glándula mamaria tumoral.