Efecto de LPS en la respuesta inmune materna mediada por VIP en el modelo invitro de diálogo materno fetal

LAURA FRACCAROLI; ESTEBAN GRASSO; VANESA HAUK; SOFIA AZZAM; EDUARDO LOMBARDI; CLAUDIA PÉREZ LEIRÓS; ROSANNA RAMHORST

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; VII Congreso Argentino de Endocrinología Ginecológica y Reproductiva; 2010

Sociedad Argentina de Endocronología Ginecológica y Reproductiva

La implantación embrionaria requiere de una respuesta inflamatoria/Th1 controlada y su desregulación puede comprometer el embarazo. Las células trofoblásticas expresan receptores tipo Toll 4 (TLR-4) que a través de la interacción con LPS generan una respuesta inflamatoria controlada en la decidua materna. Dado que el VIP (péptido intestinal vasoactivo) posee efectos anti-inflamatorios y tolerogénicos, estudiamos su capacidad de modular la respuesta inmune materna en el diálogo materno-fetal en presencia de LPS. Para esto, se realizaron cocultivos de células trofoblásticas (línea celular Swan-71 de citotrofoblasto de primer trimestre) y células mononucleares totales (MNT) maternas de mujeres fértiles o con aborto recurrente espontáneo (ARE) en presencia de LPS (0.01ug/ul) y VIP (10-7M). VIP disminuyó significativamente la producción de nitritos y MCP-1 y aumentó la de IL-10 (método de Griess y ELISA respectivamente) en presencia de LPS en ambos grupos de mujeres. Asimismo, VIP aumentó específicamente la frecuencia de células CD4+CD25+Foxp3+ y la expresión de TGFb. Sin embargo, en pacientes con ARE, el aumento fue significativamente mayor en presencia de VIP+LPS alcanzando los niveles observados en las mujeres fértiles. Seguidamente, investigamos la producción de VIP en linfocitos CD4+ por análisis de citometría de flujo y la expresión de su receptor VPAC1 por RT-PCR. Luego de 24 h de cocultivo con las células Swan-71, las pacientes con ARE presentaron menor frecuencia de células CD4+ VIP+ y menor expresión de VPAC1 comparadas con las mujeres fértiles (10,9±1,6% vs 1,5±1,5%). LPS no aumentó la producción de VIP pero indujo un aumento en la expresión del receptor VPAC1 en estas pacientes. Por otra parte, analizamos la expresión de los receptores VPAC1 y 2 en las células Swan-71 luego de la incubación con LPS durante 6 h. El receptor VPAC1 constitutivo aumentó su expresión en respuesta al LPS. Además, el receptor VPAC2 también fue inducido por LPS. El conjunto de los presentes resultados nos permiten concluir que VIP es capaz de modular la respuesta inmune materna tanto en las mujeres fértiles o con ARE; sin embargo, el LPS potenciaría sus efectos en las pacientes aumentando la expresión de VPAC1 en sus MNT. Además, en las células trofoblásticas, el LPS aumentaría tanto la expresión de VPAC1 así como la expresión de VPAC2.