INVESTIGADORES
KAMENETZKY Laura
congresos y reuniones científicas
Título:
NUEVAS HERRAMIENTAS PARA GENOTIPIFICACIÓN DE Echinococcus granulosus sensu lato EN ZONAS ENDÉMICAS DE LA ARGENTINA.
Autor/es:
AVILA, HG; SANTOSG.B; CUCHER, M.; JENSEN, O.; PEREZ, .; LOPEZ, R.; NEGRO, P; ZAHA A.; FERREIRA H. B.; ROSENZVIT M.; KAMENETZKY, L.
Reunión:
Simposio; XVII Simposio Internacional sobre Enfermedades Desatendidas; 2015
Resumen:
p { margin-bottom: 0.1in; direction: ltr; line-height: 120%; text-align: left; widows: 2; orphans: 2; }a:link { color: rgb(0, 0, 255); }Lahidatidosis quística es una enfermedad desatendida que afecta alganado y humanos de todo el mundo, especialmente aquellas poblacionesde áreas remotas con economías y servicios de salud frágiles. Elagente causante es el parásito Echinococcusgranulosussensulato (s.l.) compuesto por: Echinococcusgranulosus sensu stricto (s.s.)(genotiposG1-G3) Echinococcusequinus(G4), Echinococcusortleppi(G5) Echinococcuscanadensis (G6-G10).Estas especies/genotipos difieren en la especificidad de hospedero,patogenicidad y antigenicidad. En Argentina circulan tres especies:E.granulosus s.s.(G1, G2, G3), E.ortleppi(G5) y E.canadensis(G6 y G7) (Kamenetzky y col. 2002). En este trabajo se identificóespecie/genotipo de Echinococcusgranulosuss. l. en quistes y adultos de diferentes regiones endémicas deArgentina, con la técnica tradicional de secuenciación, técnica decurva de fusión de alta resolución, en inglés: HighResolution Melting(HRM) y técnica de digestión con la enzima de restricción AluI.Materialesy métodos:Se analizaron 54 muestras de quistes de humanos y animales y deparásitos adultos.Seextrajo ADN con Fenol-Cloroformo y con el Kit comercialDNeasyBlood&Tissue Kit?QIAGEN, luego se amplificó una regióndel gen mitocondrial CO1 (Bowles y col. 1992). Los productos deamplificación fueron digeridos con la enzima de restricción AluI.Otro grupo de muestras fue genotipificado por HRM (Santos y col.2013). Además de ser analizadas con las técnicas alternativas, lasmuestras fueron genotipificadas por secuenciación y posterioralineamiento con secuencias de referencia de cada genotipo.Resultados:Deltotal de muestras analizadas el 96,3% pertenecieron al genotipo G1encontrándose en ovinos, bovinos y perros. Fuemuy interesante observar que un caso humano fue producido por E.ortleppi(G5) y otro por E.canadensis(G6). Los resultados para cada técnica alternativa coincidieron conlos resultados arrojados por secuenciación y alineamiento.Conclusiones:La implementación de técnicas alternativas a la secuenciación, sibien aún no permite discriminar genotipos, permitió laidentificación en menos de 48hs de especies (grupos de genotipos)con mínimo equipamiento y a bajo costo. Aplicando todas las técnicasen conjunto se logró identificar especies y genotipos de muestrasprovenientes de hospedadores intermediarios, definitivos yprovenientes de cirugía en humanos. Enel futuro se incluirán mástécnicasalternativas sencillas y económicas, o se optimizarán lasdisponibles, para discriminar todos los genotipos.