Análisis de grupos segregantes (Bulk Segregant Analysis) para polipéptidos asociados al pH en pericarpio de tomate

PEREIRA DA COSTA, JAVIER H; RODRÍGUEZ, GUSTAVO RUBÉN; PRATTA, GUILLERMO RAUL; ZORZOLI, ROXANA; PICARDI, LILIANA AMELIA

La Plata

Congreso; XXVIII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2010

En estudios previos se detectó por análisis de un único punto un QTL (Quantitative Trait Loci) asociado al pH de los frutos de tomate. Para esos experimentos se cosecharon frutos en estado verde maduro sobre 69 plantas de una retrocruza entre el híbrido interespecífico Solanum lycopersicum (cv. Caimanta, tomate cultivado) x S. pimpinellifolium (LA722, tomate silvestre) y el padre cultivado, detectándose por SDS-PAGE una banda polipeptídica de 54 kDa aportada por el padre silvestre que estuvo asociada a una disminución en el pH de los frutos. El objetivo de este trabajo fue analizar esa banda por Electroforesis Bidimensional en gel (2D-PAGE). Para la identificación de los polipéptidos correspondientes a esta banda, se formaron dos grupos (bulks) de 10 extractos proteicos cada uno, correspondientes a genotipos cuyos frutos difirieron tanto en el pH como en la presencia/ausencia de la banda. Como las muestras habían sido obtenidas para su análisis por SDS-PAGE, fueron sometidas a un protocolo de reemplazo de detergente que las hiciera compatible con 2D-PAGE. Se detectaron 4 spots de la masa molecular esperada que estuvieron presentes en el grupo de genotipos de bajo pH y ausente en el de alto pH. Estos spots se identificaron por MALDI-TOF y dos de ellos mostraron similitud con la subunidad CF1 de la cadena alpha de la ATP sintasa en especies de Solanaceas. Estos resultados permiten avanzar en el significado biológico del QTL detectado, ya que el pH más bajo de los frutos podría ser explicado por la presencia de la subunidad CF1 proveniente del padre silvestre.