INVESTIGADORES
JAHN Graciela Alma
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de un nuevo protocolo de ELISA para detectar anticuerpos específicos anti-Trypanosoma cruzi en piches (Zaedyus pichiy; Xenarthra, Dasypodidae).
Autor/es:
ACTIS EA; DEL BALZO D; CARGNELUTTI DE; JAHN G; MACKERN-OBERTI JP; SUPERINA ME
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Congreso; XXVIII Jornadas Argentinas de Mastozoología; 2015
Institución organizadora:
SAREM
Resumen:
El ciclo selvático de Trypanosoma cruzi incluye más de 180 especies de mamíferos silvestres queactúan como reservorio. Si bien la presencia de T.cruzi ha sido confirmada en varias especies dearmadillos, existe sólo un registro antiguo en piches (Zaedyus pichiy), uno de los animales másbuscados por los cazadores furtivos en Mendoza. Dado el potencial zoonótico de este parásito, esfundamental confirmar el rol del piche como reservorio. Debido a la inespecificidad y ausencia en elmercado de pruebas serológicas comerciales para detectar anticuerpos anti-T.cruzi en mamíferossilvestres, desarrollamos en nuestro laboratorio un ELISA para detectar anticuerpos anti-T.cruzi ensuero de piche. Para ello, primero generamos un antisuero específico para IgG de piche, purificandocadenas pesadas gamma de IgG de sueros de piches silvestres (de los departamentos Lavalle, SanRafael y Malargüe de Mendoza) mediante separación por electroforesis. Las cadenas gammapurificadas luego se utilizaron para inmunizar ratones BALB/c con adyuvante de Freund completo,de los cuales se recolectó sangre para obtener el antisuero de interés. Se adsorbieron antígenos deT.cruzi Fatala Chabén en placas ELISA. Luego de 3 lavados con PBS-Tween 20, los sueros a analizarse incubaron a diferentes diluciones. La presencia de IgG específica para T. cruzi se evidenciómediante el antisuero generado previamente. Posteriormente se adicionaron anticuerpos anti-IgGde ratón conjugados con peroxidasa para detectar la presencia de los anticuerpos específicos,seguido de la adición del cromógeno. Con esta técnica logramos identificar la presencia de altosniveles (>4.DO del límite de reacción) de IgG específica para T.cruzi en 1/14 de los sueros de picheanalizados, mientras que 4/14 presentaron bajos niveles (>3.DO y
