Análisis molecular del gen MSN2 de S. cerevisiae

DANIELA MAZA; FABIOLA MIRANDA LEIVA; SILVANA VIÑARTA; MANUEL AYBAR

San Miguel de Tucumán

Congreso; III Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2015

Sociedad de Biología de Tucumán, Rosario y Buenos Aires

El gen MSN2 codifica un factor detranscripción que participa en la regulación de un conjunto de genes derespuestas adaptativas a condiciones de cultivo adversas tales como estrés oxidativo,osmótico, térmico y deficiencia de glucosa en el medio. En el presente trabajose llevó a cabo el clonado del gen MSN2 y se estudió la respuesta de laexpresión del mismo frente a diferentes condiciones de estrés osmótico de unacepa de referencia de S. cerevisiae. Sellevó a cabo el análisis bioinformático de secuencias de genes MSN2 en diferentesorganismos y se evaluó el efecto del estrés osmótico generado por KCl y el NaClsobre el crecimiento de S. cerevisiae ATCC 32051. En estas condiciones decultivo se evaluó el nivel de expresión del gen MSN2 mediante RT-PCR semicuantitativa.Se identificaron posibles ortólogos de MSN2 en otras especies de hongos y fueposible encontrar regiones de similitud que podrían guiar el clonado porhomología de este gen en otras especies de interés. El estrés osmótico afectó elcrecimiento normal de S. cerevisiae, presentandouna mayor tolerancia al KCl que al NaCl. A medida que se incrementó laconcentración de NaCl o KCl en el medio, se observó un incremento en el tiempode generación y un retardo de las fases de crecimiento. Elevadas concentracionesde NaCl y KCl (> 1,5M) resultaron tóxicas para S. cerevisiae. El máximo nivel de expresión de MSN2 se alcanzó a0,5M NaCl y se observó por primera vez que lo altos niveles de expresión se mantienenhasta las 12 horas de cultivo. Los resultados sugieren que el gen MSN2 resultaclave para la respuesta al estrés osmótico y que la expresión del mismo esnecesaria por largos períodos de tiempo para mantener la adaptación acondiciones culturales adversas.