“Especificidad de diferentes competidores por el sitio de unión de progesterona y corticosterona en fracción de membranas de oviducto”.

PERALTA, L.; ROLDÁN, M. Y MICELI, D. C

Tafi del Valle, Tucuman, Argentina

Jornada; XV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Tucumán; 1998

Sociedad de Biología de Tucumán

ESPECIFICIDAD DE DIFERENTES COMPETIDORES POR EL SITIO DE UNION DE PROGESTERONA Y CORTICOSTERONA EN FRACCION DE MEMBRANAS DE OVIDUCTO   Luisa Peralta, Mariela Roldán y Dora Miceli. Dep Biol. Del Des. INSIBIO, UNT-CONICET. Tucumán.   En estudios previos habíamos demostrado que en el oviducto de cerdo las hormonas esteroideas podían también ejercer su efecto a trav’es de receptores en membranas diferentes a posclásicos receptors nucleares. Se demostró que Progesterona (P) une con una afinidad de Kd= 3.03nM y corticosterona (C) con afinidad de Kd= 14.6 nM. La capacidad del sitio de (P) es mayor que para (C) siendo Bmax (P) = 3375 fmol/mg de prot. Y Bmax (C)= 1779 fmol/ mg de prot. Para conocer si se trata de un sitio común a ambas hormonas o de dos sitios diferentes, se realizaron estudios de unión con H3 (P) y H3 (C) y desplazamiento cruzado con ambas hormonas frías para los dos sitios. Los resultados indican que se trataría de dos sitios diferentes por cuanto el sitio de H3 (P) es específico de (P) mientras que el sitio de H3 (C) une a ambas hormonas con similar afinidad. Con el objetivo de conocer la especificidad de ambos sitios se utilizaron diferentes análogos y posibles competidores. Los estudios de unión y desplazamiento se realizaron en fracción de membranas de oviducto de cerdo en fase luteal a 0-4 0C durante 45 min con concentración de H3 (P) = 7.7 nM y H3 (C) = 15 nM. Se observó que el estradiol (E) presenta un IC50= 56 nM y es el mayor competidor por los sitios de (P) después de la propia (P). El ligando específico del receptor nuclear R5020, como así también (C) tienen mucha menor afinidad por el sitio de la (P) con IC50= de 3200 nM para ambas hormonas. Considerando que (E) presentaba especificidad de unión para el sitio de (P) se probó con dietilestilbestrol (DEES), ligando reconocido del receptor nuclear de (E). El DEES presenta un IC50 para los sitios de (P) significativamente mayor al estradiol indicando que el receptor de membrana tiene especificidad diferente al citosólico. Por otra parte, considerando los posibles mecanismos postulados para la acción de las hormonas esteroideas en membrana se probaron ligandos antagonistas de receptores a y b adrenérgicos tales como propranolol y fentolamina respectivamente. Se comprobó que tales compuestos no compiten por los sitios de unión de (P). Respecto a la especificidad del sitio de (C) se comprobó que (P) compite en igual forma que (C) en tanto mineralocorticoides como aldosterona y glucocorticoides como triamcinolona no presentan afinidad por el sitio de (C).