gPAT la Acil-transferasa involucrada el la palmitolación de proteínas de superficie y en el crontrol de citotoxicidad en Giardia

MARIA ROMINA RIVERO; CONRAD JT; NASH THEODORE; HUGO DANIEL LUJÁN; MARIA CAROLINA TOUZ

Villa Giardiano - Córdoba

Jornada; XV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2005

Sociedad de Biología de Córdoba

El protozoario parásito Giardia lamblia cambia espontáneamente la expresión de sus proteínas de superficie o VSPs (Variant-specific Surface Proteins) en un proceso denominado variación antigénica. Las VSPs son proteínas de membrana tipo I y poseen una secuencia hidrofóbica conservada seguida de cinco aminoácidos invariables (CRGKA) en su extremo C-terminal citoplasmático. La conservación absoluta de la cola citoplasmática sugiere una importante función biológica .Utilizando trofozoítos de Giardia lamblia  transfectados con VSPH7  e incubados con (3H)ácido plamítico hemos demostrado que el aminoácido cisteína de la cola citoplasmática  CRGKA une palmitato. Mutantes de VSPH7 que carecen del amino ácido cisteína o de la cola citoplasmática no son palmitoladas y se encuentran en la membrana plasmática del trofozoíto. Sin embrago, a diferencia  de la proteína nativa, dichas mutantes no se encuentran localizadas en dominios raft y son incapaces de medir citotoxicidad anticuerpo-específica. Las enzimas encargadas de la palmitolación  de proteínas se denominan palmitoil-transferasas o acil-transferasas y poseen un motivo DHHC rico en cisteína en su sitio activo. En Giardia, hemos encontrado una proteína de 50 kDa que contiene el motivo DHHC y a la que llamamos gPAT. La expresión de una proteína de fusión gPAT-V5 mostró localización en la membrana plasmática de trofozoítos presentando un patrón similar al de las VSPs. Inhibición de la expresión de gPAT mediante la utilización de RNA antisentido disminuyó notablemente la palmitolación de VSPs tanto in vitro como in vivo. Si bien no es clara la función biológica de la palmitolación, su presencia en la región conservada de las VSPs y su participación en el anclaje a dominios raft de la membrana plasmática, sugieren una función esencial en el control de senales que regulan la expresión y procesamiento de las proteínas de superficie en Giardia.