INVESTIGADORES
LUJAN Hugo Daniel
congresos y reuniones científicas
Título:
REGULACIÓN POST-TRANSCRIPCIONAL EN LA EXPRESIÓN DIFERENCIAL DE ANTÍGENOS DE
Autor/es:
CESAR GERMAN PRUCCA; RODRIGO QUIROGA; ILEANA SLAVIN; HUGO DANIEL LUJÁN
Lugar:
Curitiba. Brasil
Reunión:
Workshop; Workshop:Avaliacao pos-genomica da expressao genica em parasitas; 2006
Resumen:
Giardia lamblia es un protozoario parásito causal de enfermedad intestinal en cualquier lugar del mundo y uno de los organismos eucariotas más primitivos. Giardia, similar a otros parásitos unicelulares, presenta variación antigénica. Este protozoario se encuentra recubierto en su totalidad por una proteína perteneciente a una gran familia y denominadas proteínas variables de superficie (VSPs: variant-specific proteins). Estas moléculas presentan un rango de tamaños que van desde 20 a 200 KDa. Estructuralmente se componen por una región amino terminal muy variable y rica en cisteina (con numerosos motivos CxxC), como así también una región carboxilo terminal compuesta por un dominio transmembrana y una extensión citosólica compuesta sólo por cinco aminoácidos (CRGKA). Hemos evidenciado la presencia y actividad de dos enzimas claves en el proceso de silenciamiento post-transcripcional: una ARN polimerasa dependiente de ARN (gRdRp) y una nucleasa de ARN doble cadena, con dos dominios RNAsa III y un dominio PAZ además de poseer actividad dependiente de ATP (gDicer). Estas enzimas muestran homología con los componentes de la maquinaria de silenciamiento post transcripcional ya descritos en otros eucariotas, sugiriendo una función similar en esta primitiva célula. Ensayos de Northern blot revelaron que las mismas presentan expresión durante todo el ciclo de vida del parásito. La disminución en la expresión (knock-down) de estas dos enzimas da lugar a la presencia de trofozoitos que expresan más de una proteína variable de superficie, hecho que fue confirmado mediante ensayos de citometria de flujo e inmunofluorescencia utilizando anticuerpos monoclonales; además de ensayos de qRT-PCR utilizando primers específicos para diferentes VSPs. Estos resultados involucran a estos dos componentes en la regulación de la variación antigénica en Giardia.
