INVESTIGADORES
CASTRO Marcela Paola
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis del perfil de expresión de sakacinas de Lb. curvatus ACU-1
Autor/es:
ÁLVAREZ, ORNELLA E.; CAYRÉ, M.E.; CASTRO M.; MINAHK CARLOS; SAAVEDRA LUCILA
Reunión:
Otro; Reunión de Difusión de la Labor Docente, Científica, Tecnológica y de Extensión de la UNCAus; 2017
Institución organizadora:
Uncaus
Resumen:
El objetivo del siguiente trabajo fue analizar y cuantificar el perfil de expresión de sakacinas de Lb. curvatus ACU-1. Se realizó un ensayo de qPCR tras el aislamiento de ARN a partir de cultivos en fase exponencial y estacionaria en caldo MRS de Lb. curvatus ACU-1. Este microorganismo ha demostrado expresión de skgA1 (gen que codifica para sakacina G) desde etapas tempranas ya que después de 6 h de cultivo tenía casi 1 × 107 copias por µl. Además, las copias aumentaron hasta 6,13 × 107 a 16 h. En cuanto a los genes sppA (sakacina P) y sppQ (sakacina Q), se expresaron en mucha menor proporción en esta cepa. En realidad, se encontró 4-8 × 104 copias de sppQ mientras que la expresión sppA se encontró que era casi insignificante, con menos de 103 copias por µl incluso en 16 horas de cultivo. Luego de las mediciones qPCR, a las muestras de cada condición se realizó una electroforesis y se visualizaron por tinción GelRed (Genbiotech, Argentina). Lb. curvatus ACU-1 contiene al menos un plásmido, por lo tanto, la posible presencia de genes skgA1, sppA y sppQ en el plásmido fue analizada mediante la realización de amplificaciones por PCR. Resultados de PCR demostraron que skgA1 y sppQ fueron localizados en el plásmido de Lb. curvatus ACU-1, mientras que sppA estaba presente sólo en el cromosoma. Por otra parte, los cebadores diseñados por Dortu et al. (2008), permitieron la amplificación de un fragmento de 492 pb en Lb. curvatus ACU-1, lo que sugiere fuertemente la presencia de genes estructurales duplicadas de sakacina G.