Obtención de la primera generacion filial entre cultivares de soja para la identificación de genes de resistencia a Diaporthe phaseolorum var. caulivora.

PERUZZO, A.M.; PIOLI, R.N.; CAIRO, C,; PRATTA, G.R.; PLOPER, L.D.

Rosario

Congreso; XVIII Congreso y XXXV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2015

Sociedad Argentina de Genética

La agricultura moderna requiere estrategias que incrementen la productividad de manera sustentable, siendo la incorporación de resistencia durable una estrategia eficaz para reducir el daño causado por enfermedades en armonía con la calidad de vida y el ambiente. La cancrosis del tallo en soja causada por el hongo Diaporthe phaseolorum var. caulivora (Dpc) es una de las enfermedades actuales más relevantes del cultivo. La obtención de cultivares con resistencia genética ha sido dificultosa por no estar aún identificados los genes involucrados. El objetivo del trabajo consistió en realizar cruzamientos entre los genotipos seleccionados en evaluaciones previas por su comportamiento diferencial (resistente, R /susceptible, S) a Dpc. Para ello, en 2013/14 y 2014/15, se efectuaron de 90 cruzamientos complementarios (R x S) utilizando 11 padres R y 12 S. Se realizaron 4 siembras escalonadas a intervalos de 4 días, incluyendo 4 semillas por genotipo, en macetas de 3 litros con una mezcla 1:1 de suelo/arena. En 2014/15 se incluyeron además 36 cruzamientos transgresivos (R x R), realizando 6 siembras escalonadas a intervalos de 4 días, incluyendo 4 semillas por genotipo. Las plantas se desarrollaron dentro de una estructura con protección antigranizo y se procedió a emascular flores a medida que estas maduraban. En la flor receptora de polen (femenina) se retiraron los sépalos, pétalos y anillo de estambres apenas los petalos fueron visibles entre los sépalos. En la flor dadora de polen (masculina) totalmente abierta en inicio de antesis, se tomó el anillo de estambres para polenizar. El polimorfismo de los padres fue evaluado mediante un estudio preliminar con tres marcadores SSR (simple sequence repeat), el SattI, SattII y SattV. La extracción del ADN se realizó con Wizard Genomic DNA Purification kit, a partir de dos hojas recolectadas en estadio V3. La amplificación se llevó a cabo con un termociclador T100TM (BIO-RAD) de acuerdo al protocolo utilizado en experiencias previas. La separación de los productos de amplificación se realizó en gel de poliacrilamida al 6% revelado con nitrato de plata. La efectividad bio-morfológica de las fecundaciones con producción de semillas F1 fue 52 y 50% para los cruzamientos complementarios y transgresivos, respectivamente, mostrando igual eficacia de la técnica de inoculación (chi-cuadrado = 0,0004) en ambos tratamientos (RxS) y (RxR) durante los dos años. De los genotipos evaluados, algunos genotipos amplificaron con el SattV presentando la misma banda a 250pb, sin embargo con el mismo cebador, otros genotipos revelaron dos bandas (de 250 y 300 pb). Con SattI y SattII, los genotipos amplificaron bandas entre 500 y 600pb. Se prevé re analizar los casos no resueltos en ambos tipos de geles y ampliando el rango de cebadores, previamente a la obtención de las poblaciones segregantes F2 y análisis de su respuesta fenotípica, a fin de caracterizar la herencia de los genes de resistencia.