Análisis de la Respuesta Innata desencadenada por un patógeno de vías respiratorias hoy considerado re-emergente

GRISELDA MORENO; ROY ROBERTS; MARTIN RUMBO; DANIELA HOZBOR

Mar del Plata. Buenos Aires. Argentina

Congreso; LV Reunión Cienífica Anual Sociedad Argentina de Inmunología; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología

<!-- @page { size: 21cm 29.7cm; margin: 2cm } P { margin-bottom: 0.21cm } --> Bordetella pertussis es el principal agente causal de una enfermedad respiratoria aguda denominada pertussis o tos convulsa que afecta preferentemente a niños menores de un año de edad. Si bien con el uso masivo de la vacunación disminuyó significativamente la morbi-mortalidad, en las últimas décadas se registra una resurgencia de la enfermedad aún en zonas con alta cobertura de vacunación. Varias son las causas que pueden explicar el fenómeno, la mayoría de ellas están asociadas a problemas con las vacunas: baja duración de la inmunidad conferida, divergencias entre las cepas vacunales y la población bacteriana circulante. Esta situación de re emergencia de la enfermedad marca la necesidad de mejorar las actuales formulaciones. Una posibilidad de mejora podría incluir la inmunización por vía intranasal que se corresponde con la vía de infección natural en la que se ha observado una duración de inmunidad más prolongada en el tiempo. Este trabajo tiene como objetivo analizar la respuesta inmune en mucosas que se desencadenan cuando B. pertussis ingresa al hospedador por vía intranasal. Para estos estudios se empleó una cepa que se utiliza en la producción de vacunas (B. pertussis Tohama) y un aislamiento clínico local (Bp 006). Se incluyó en el análisis la comparación entre bacteria viva y bacteria muerta. Se utilizaron cinco animales por condición, los cuales recibieron por vía in los distintos estímulos(concentración bacteriana empleada en todos los casos 107 UFC/50 ul).A 2 y 8 hs posteriores a la inoculación se colectaron los pulmones y homogenizaron en buffer RA1 (NucleoSpin) para la extracción de RNA total. La expresión de los marcadores de respuesta innata se cuantificaron con la técnica de qRT-PCR. A las 2 hs postinoculación de la cepa vacunal viva se pudo observar una aumento en los niveles de expresión de los marcadores en comparación a los observados en el control con PBS: CCL20: 9.21±2.7 vs 1.26±0.68; TNFa: 37.8±20 vs 1.02±0.48; IL6: 65±22 vs 1.01±11. Los valores representan la media del incremento (2 dCt). Para esta cepa no se observaron diferencias en los niveles de expresión para el estado vivo o muerto. Llamativamente cuando se analizó la expresión de genes en la cepa local hubo un incremento significativo de los valores obtenidos con bacteria muertas respecto a los valores obtenido con bacterias vivas (ej: IL6: 80±30 vs 20±10). Así este trabajo evidencia que existe una respuesta diferencial en la respuesta inmune innata en mucosas según la cepa de Bordetella pertussis utilizada. Es interesante seguir avanzando en este aspecto ya que el uso de la inmunización mucosal contra B pertussis esta avanzando en modelos murinos.