EXPRESIÓN DE ITI (INTER-ALPHA-TRYPSIN INHIBITOR) EN EL ÚTERO DE ALPACAS PREÑADAS

MARIANA ESCUDERO; XIMENA A. CASTRO GONZALEZ; RENATO ZAMPINI; MARTIN E. ARGAÑARAZ

San Miguel de Tucuman

Jornada; XX Jornadas Científicas y Encuentros de Jóvenes Investigadores; 2019

INTRODUCCIÓN: La implantación embrionaria (IE) es una etapa crítica de la preñez, en la cual se producen elevados porcentajes de pérdidas embrionarias (60% en camélidos sudamericanos, CSA). El estudio de los mecanismos moleculares del endometrio receptivo durante la IE es relevante; y más aún en el caso de CSA; en los que aún no se dilucidó porqué la IE sólo ocurre en el cuerno uterino izquierdo (CUI). ITI participa en la ovulación, maduración ovocitaria, fecundación y también interviene en la IE interaccionando con componentes del glicocálix, como el ácido hialurónico (HA). Hasta el momento no sé ha descripto la presencia de ITI en CSA, ni su rol en la IE diferencial que ocurre en estas especies. En base a sus funciones biológicas pensamos que ITI puede estar involucrada en la IE en camélidos y que podría constituir un marcador defertilidad en estas especies. OBJETIVOS: Caracterizar la expresión y localización de ITI en el endometrio alpacas preñadas.MATERIALES Y MÉTODOS: Se trabajó con endometrio de alpacas preñadas (15 días)pertenecientes a la Estación IVITA Maranganí, Universidad San Marcos, Perú. Porciones de CUI y CUD se conservaron en un reactivo para estabilizar proteínas (RNAlater) o en formol tamponado 4% (pH: 7,4). Los tejidos en RNAlater se lisaron mecánicamente y se emplearon para Western Blot. Una vez transferidas las proteínas, las membranas de PDVF se incubaron con IgG de conejo anti-ITI-Bk humana y un anticuerpo anti-conejo-Cy3, sucesivamente. Posteriormente, se incubaron con IgG de ratón anti-actina (referencia) y un anticuerpo secundario . Se cuantificó la señal y se hizo una relación ITI/actina. Los tejidos en formol se emplearon para inmuhohistoquímica. Los cortes de útero se incubaron con un IgG de conejo anti-ITI-H1 humana, un IgG de cabra anti-ratón-biotina, y estravidina-fosfatasa alcalina, secuencialmente y se reveló con NBT/BCIP.RESULTADOS:Se detectaron dos isoformas, la proteína madura de 225 kDa y la pre-ITI de 116 kDa. Además, la proteína se localizó en el epitelio glandular del endometrio de CUI y CUD, y en el interior de algunos vasos sanguíneos. No se observaron diferencias entre CUI y CUD.CONCLUSIONES: La presencia de ITI, en los CUs de alpacas preñadas, sugiere suparticipación en la IE. ITI ayuda a la estabilización AH evitando su degradación quizás tenga una función similar durante la preñez en CSA.