Maduración de Células Dendríticas y Trypanosoma cruzi en un modelo de co-cultivo in vitro.

PONCINI C, ALBA SOTO C, SOLANA ME, GONZÁLEZ CAPPA S.

Mendoza ,Argentina

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

Maduración de Células Dendríticas y Trypanosoma cruzi en un modelo de co-cultivo in vitro. Poncini C, Alba Soto C, Solana ME, González Cappa S. Dpto. Microbiología. Fac. Medicina. UBA. Piso 13. Paraguay 2155. CP1121. CABA. caropncn@hotmail.com Previamente demostramos que la infección de ratones C3H/HeN con la cepa RA de T. cruzi inhibe la maduración de las células dendríticas (CD) esplénicas. Nuestro objetivo fue contar con un modelo in vitro de co-cultivo de T. cruzi con CD derivadas de médula ósea para intentar dilucidar factores parasitarios responsables de inducir las alteraciones observadas en su maduración in vivo. Se prepararon cultivos enriquecidos en CD a partir de médula ósea murina, los que se sometieron a diversos estímulos (LPS, tripomastigotes circulantes –trip, y lisados de epimastigotes de cultivo –epi, ambos de la cepa RA de T.cruzi). Los cultivos presentaron al microscopio de epi-iluminación células no adherentes con proyecciones dendríticas. El análisis fenotípico por citometría de flujo, reveló que el 40 % de las células eran CD11c+. De ellas, 75% co-expresaron MHCII, marcador asociado a madurez, y moléculas coestimulatorias CD80 (75%) y CD86 (95%). Además, el 98,7% de las CD11c+ expresaron CD11b pero no CD8a (linaje mieloide). Evaluamos la respuesta a diferentes los estímulos de las CD con alta densidad de moléculas de MHCII en superficie y encontramos que el LPS (10mg/ml, 24h) incrementó entre 60 y 100% el número de estas CD comparado con los controles sin estímulo. El lisado de epi (10mg/ml, 24h) también produjo un incremento aunque solo del 30% en el número de CD de estas características. Sin embargo, el co-cultivo con trip (rel. CD:trip 1:4, 24h) no indujo variaciones significativas, pero inhibió en un 55% el incremento inducido por LPS. Las CD generadas in vitro reproducen características observadas ex vivo y responden al co-cultivo con trip RA alterando la expresión de MHCII inducida por LPS. Por lo tanto, el modelo podría ser útil para analizar factores parasitarios responsables de estas alteraciones.