¨Diagnóstico molecular de S. stercoralis en pacientes en pacientes sin riego de infección exógena?

REPETTO SILVIA ANALIA; ALBA SOTO CATALINA D; LOPEZ CARLOTA; GONZALEZ-CAPPA STELLA MARIS

Guayaquil

Congreso; XXI Congreso Latinoamericano de Parasitología; 2013

Federación Latinoamericana de Parasitología

¨Diagnóstico molecular de S. stercoralis en pacientes en pacientes sin riego de infección exógena? El diagnóstico de Strongyloides stercoralis se realiza por observación microscópica de larvas en materia fecal. En las infecciones crónicas no complicadas, un único examen presenta una sensibilidad de 30%, por la fluctuante excreción de larvas. La droga de elección para el tratamiento es la ivermectina. Actualmente no hay registro de cura espontánea.1-5 Los pacientes inmunocomprometidos con infección crónica asintomática y sin riesgo de infección exógena, constituyen un problema sanitario de interés, en especial en zonas no-endémicas en las que no siempre se incluye esta parasitosis en el diagnóstico diferencial con otras patologías, así como a la falta de herramientas diagnósticas de alta sensibilidad que permitan la evaluación inicial de estos pacientes y su seguimiento post-tratamiento. En estos pacientes las infecciones severas presentan una mortalidad de hasta el 80%. 4-6 En nuestro laboratorio estandarizamos el CAN (cultivo en agar nutritivo), que presentó una sensibilidad de 90% y valor predictivo negativo de 91% frente a los métodos habituales basados en la visualización de larvas.7 Para incrementar la sensibilidad diagnóstica desarrollamos una PCR convencional en materia fecal. Primero, estandarizamos una técnica artesanal de extracción de ADN de nematodes en materia fecal. Esta incluye un buffer con glicina-EDTA posterior ruptura por congelación/descongelación previo a la extracción de ADN.8,9 La sensibilidad analítica se realizó a partir de ADN obtenido de 1 larva/g mf, utilizando en paralelo nuestro método artesanal y un kit comercial.10 Se utilizaron dos cebadores dirigidos contra el gen 18S de rRNA de S. stercoralis y como templado diluciones en diez de las muestras de ADN obtenidos por ambos métodos. El límite de detección fue de 10-2 y 10-1 diluciones cuando el ADN se extrajo con el método artesanal y con el kit comercial respectivamente. La especificidad se determinó en muestras de voluntarios sanos y en pacientes con otras enteroparasitosis, enterobacterias y hongos. 11,12 Se evaluó en 59 pacientes con antecedentes de residencia pasada en área endémica sin riesgo de reinfección exógena. Se realizó parasitológico en fresco, recolección seriada, CAN y PCR. Los pacientes positivos se trataron con dos ciclos de ivermectina 200 μg/kg/día dos días. El control post tratamiento se realizó entre 7-360 días. Se evaluó eosinofilia (>450 eo/ mm3) pre y post tratamiento. Veintiocho (47%) pacientes presentaban estrongiloidosis, todos con PCR positiva desde la primera muestra. En 21 (80,7%) de ellos se hallaron larvas y en 13 (46%) de éstos sólo por CAN. Dos de los 13 pacientes presentaron larvas en el primer CAN. Veintitrés (82%) pacientes tenían eosinofilia, 16 de ellos asintomáticos. Esta disminuyó en todos post tratamiento (p