Distintos linajes de Trypanosoma cruzi inducen diferentes niveles de activación en NK.

BATALLA, ESTELA; PONCINI, CAROLINA; MIRKIN, GERARDO A.; ALBA SOTO, CATALINA

Santa Fé

Simposio; XXIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2009

Sociedad Argentina de Protozoología

Las células NK están involucradas en protección contra T. cruzi mediante citotoxicidad y producción de IFN-γ. Sin embargo recientemente se han vinculado a NK propiedades reguladoras mediante la producción de IL-10 en etapas crónicas de la infección con parásitos relacionados como Leishmania donovani. También se ha demostrado que, frente al estimulo microbiano, las células dendríticas (CD) contactan NK promoviendo su activación, expansión, producción de IFN-γ y actividad citotóxica. A su vez las NK pueden, mediante citoquinas y/o contacto directo, madurar CD o ejercer citotoxicidad sobre CD inmaduras. Nosotros encontramos alteraciones funcionales en las CD de bazo de ratones infectados con la cepa RA (alta virulencia) pero no con K98 (baja virulencia) de T.cruzi, por lo que nos propusimos evaluar la funcionalidad de las NK en nuestro modelo. Previamente describimos aumento en el porcentaje de NK en sangre de ratones infectados con ambas cepas desde 2 dpi y observamos que éstas son productoras de IL-10. Debido a esta característica y a reportes en la literatura de poblaciones de NK con propiedades de presentación antigénica estudiamos si presentaban este fenotipo en nuestro modelo. Aquí analizamos por citometría de flujo a los 18 dpi la expresión de CD11c y MHC-II en superficie de NK (DX5+CD3-). Luego, estudiamos el estado de activación de las NK a este tiempo, midiendo el marcador de activación temprano CD69, y empleando distintas dosis de LPS administrado por vía intradérmica como control positivo de activación. Por otro lado analizamos el potencial citotóxico de las NK evaluando la mobilización de gránulos citotóxicos a la superficie celular midiendo, post-estimulo, el marcador CD107a (LAMP-1). Nuestros resultados señalan que para ambas cepas de T.cruzi, las NK no presentan marcadores propios de CD.  En cambio, el porcentaje de NK CD69+ aumentó en ratones infectados con la cepa de mayor virulencia RA no así en ratones infectados con K98 (p<0,05 RA vs. K98 y controles negativos). Además, comprobamos aumento del porcentaje de células NKCD107a+ con RA (p<0,05 RA vs. controles). Resumiendo, en nuestro modelo experimental encontramos que ambas cepas inducen en NK niveles similares de producción de IL-10 y no expresan marcadores de células presentadoras de antígeno. Sin embargo, las NK presentan diferentes niveles de activación y citotoxicidad, proporcionales a la virulencia de la cepa de T. cruzi en etapa aguda de la infección. Esto podría estar relacionado con la multiplicación parasitaria, que es mayor en RA, o con diferencias en la expresión de factores de virulencia que pudiesen activar NK.