PCR en materia fecal: Nueva herramienta para diagnóstico y seguimiento de pacientes con estrongiloidosis fuera de área endémica.

REPETTO SILVIA ANALIA; ALBA SOTO CATALINA D; TAYELDIN LIA; CUELLO MARIA SOLEDAD; CAZORLA SILVIA I.; LOPEZ CARLOTA; SOLANA MARIA ELISA; TEKIEL VALERIA; GONZALEZ-CAPPA STELLA MARIS

Bogotá

Congreso; XX Congreso Federación Latinoamericana de Parasitología – Flap. XV Congreso Asociación Colombiana De Parasitología Y Medicina Tropical – ACPMT. Bogotá, Colombia. 27 de Septiembre – 1 de Octubre de 2011; 2011

FLAP-ACPMT

PCR en materia fecal: Nueva herramienta para diagnóstico y seguimiento de pacientes con estrongiloidosis fuera de área endémica. Silvia Repetto1; Catalina D. Alba-Soto1; Lía Tayeldin1; María S. Cuello1; Silvia Cazorla1; Carlota López 1; María Elisa Solana1; Valeria Tekiel 2; Stella González-Cappa1. 1 Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología, Facultad de Medicina. UBA. 2 Universidad Nacional de San Martín. Introducción: Strongyloides stercoralis (Ss), endémico en Argentina, resulta en infecciones crónicas por autoreinfección. La hiperinfección/diseminación requiere factores predisponentes como el tratamiento con glucorticoides y alcanza una mortalidad de hasta 80%. El diagnóstico habitual es por observación de larvas en materia fecal (mf) por métodos directos. En infecciones crónicas la sensibilidad de éstos es de 30%. En nuestro laboratorio el cultivo en agar nutritivo (CAN) mostró: sensibilidad 90%, valor predictivo negativo 91%. Para incrementar la sensibilidad desarrollamos una PCR artesanal en mf que detecta hasta 0,25 larvas/g/mf. Aquí comparamos la utilidad de esta PCR con métodos tradicionales y CAN, para diagnóstico y seguimiento postratamiento (pt). MATERIALES Y MÉTODOS: Estudiamos pacientes, con antecedentes de área endémica, sin riesgo de infección exógena actual. En la 1a evaluación se realizó Ritchie, fresco, CAN, PCR en mf (2-3 muestras) y recuento de eosinófilos. Los positivos fueron tratados con ivermectina. Seleccionamos 7 que se evaluaron entre 15-1095 dpt. -Extracción de ADN: lisis mecánica más química con proteinasa K, tratamiento con fenol: cloroformo: isoamílico, precipitación con etanol. -PCR: Controles+: ADN de Ss. Controles-: ADN de voluntarios sanos. Los cebadores se diseñaron a partir del gen 18S rRNA. RESULTADOS: Pacientes 1, 2, 3 recibían metilprednisona por Artritis Reumatoidea. Pacientes 1, 2 asintomáticos con eosinofilia: CAN+, 2a muestra. Paciente 3 meningitis por E.coli sin eosinofilia: larvas en 1er examen fresco. Paciente 4, VIH+ 12 LTCD4/mm3, con eosinofilia, asintomático, larvas en 1er CAN. Pacientes 5, 6, 7 inmunocompetentes con eosinofilia: Pacientes 5, 6 CAN+ 1a muestra; Paciente 7 CAN+ 2a: muestra. PCR positivas desde la 1a muestra en los 7 pacientes. Todos recibieron ivermectina. El paciente 3 continuó con profilaxis secundaria. Todos negativizaron pt los parasitológicos convencionales, presentaron CAN-, sin eosinofilia, pero las PCR continuaron positivas. CONCLUSIONES: La PCR puede ser útil en el diagnóstico precoz y seguimiento postratamiento.