INVESTIGADORES
CARDILLO Alejandra Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Biotransformación con células bacterianas genéticamente modificadas para la producción de compuestos de interés farmacéutico: Alcaloides del Tropano
Autor/es:
CARDILLO, ALEJANDRA BEATRIZ; RODRIGUEZ TALOU, JULIAN; GIULIETTI, ANA MARIA
Reunión:
Congreso; XX Simposio nacional de química orgánica, SINAQO 2015; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica
Resumen:
Los procesos de biotransformación son una tecnología de uso frecuente en la industria biotecnológica. Esto se debe a su escaso impacto adverso sobre el medio ambiente y a las características de los cambios químicos obtenidos derivados del uso de catalizadores biológicos. La enzima Hiosciamina 6b-hidroxilasa (H6H) cataliza la conversión de hiosciamina (alcaloide presente en mayor proporción en la naturaleza) en 6b-hidroxihiosciamina y escopolamina mediante dos reacciones secuenciales. Estos alcaloides son ampliamente utilizados en medicina debido a su actividad anticolinérgica y son obtenidos a partir de la extracción de plantas pertenecientes a la familia Solanaceae, dado que la síntesis química de los mismos es dificultosa y costosa. El objetivo del presente trabajo fue el ensayo de células enteras de E. coli transformadas con la enzima H6H como biocatalizador para el desarrollo de un proceso productivo de 6β-hidroxihiosciamina y escopolamina por biotransformación. Células enteras de las cepas de E.coli Origami (O-H6H) y Origami BL21 (BL-H6H) inducidas fueron estudiadas como biocatalizador de la reacción. El catalizador fue ensayado en buffer Tris-HCl 50 mM conteniendo hiosciamina con y sin el suplemento de los cofactores de la reacción. Las cepas ensayadas fueron capaces de biotransformar hiosciamina en todas las condiciones ensayadas aunque resultó ser más eficiente cuando se suplementó con cofactores (Fig. 1). Además, la cepa BL-H6H resultó ser más eficiente como biocatalizador de la reacción ya que a las 25h de reacción transformó completamente la hiosciamina adicionada en 6b-hidroxihiosciamina y escopolamina (Fig. 1B).Actualmente se está optimizando el proceso biocatalítico con células enteras. Para ello se está evaluando el cofactor limitante que debe suplementarse a la célula para lograr la eficiente biotransformación del alcaloide.Las cepas obtenidas constituyen una herramienta promisoria y atractiva para su utilización en procesos productivos de alcaloides del tropano, factibles de optimizarlos mediante la inmovilización de las células en matrices por inclusión para la reutilización el biocatalizador en ciclos sucesivos, incrementando la productividad del proceso.