Producción recombinante de toxinas del veneno de Tityus trivittatus en Pichia pastoris como antivenenos

RODRÍGUEZ, JULIÁN MARCELO; CARDILLO, ALEJANDRA BEATRIZ; RODRIGUEZ TALOU, JULIAN

Simposio; Primer Simposio de Investigadores Jóvenes de FFyB; 2024

FFyB

COMUNICACIÓN ORALLas picaduras de escorpión, asociadas a Tityus Trivittatus y Tityus Serrrulatus, son un problema de salud pública en Argentina y Brasil, causando síntomas graves como dolor local intenso, sudoración, taquipnea, taquicardia, agitación, pancreatitis, edema pulmonar, hemólisis y necrosis asociado a neurotoxinas bloqueantes de canales de Na+, K+, Ca++ y Cl-.Actualmente, existe un anti-veneno, constituido por sueros procesados de caballos inmunizados con el veneno obtenido directamente por electroestimulación al escorpión.Ante este contexto, proponemos producir las toxinas caracterizadas del veneno, que incluyen a TT1g, TtrKIK, TsNTXP y TtrivMP_A, de forma recombinante en Pichia pastoris, en el medio de cultivo facilitando su plegamiento y purificación para obtener inmunógenos de forma estandarizada, segura y con mejor rendimiento, contribuyendo al perfeccionamiento de las inmunizaciones.Asimismo, proponemos un sistema de purificación basado en cromatografía IMAC con tag de histidina y otro utilizando un sistema de dos fases acuosas empleando la proteína fusionada a Hfb1.Empleando la fusión a Hfb1 se logró purificar la Tt1g (componente proteico mayoritario) con una concentración de 0,6 g/L. El abordaje a continuación seria mejorar el rendimiento del proceso y utilizar la fusión a Hfb1 para expresar el resto de las toxinas y generar un mejor análogo del veneno