Modulación del estallido respiratorio en monocitos humanos por ácidos grasos

INZAUGARAT MARIA EUGENIA; CHERÑAVSKY ALEJANDRA C; BAZ PLÁCIDA

Mar del Plata

Encuentro; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

SAI

La NADPH oxidasa está involucrada en la producción de especies reactivas del oxigeno (ERO) en monocitos y neutrófilos, componente celular principal del infiltrado inflamatorio hepático en la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA). En estos pacientes, los niveles plasmáticos de ácidos grasos (AG) son elevados. Los AG alteran la actividad de la PKC llevando a la fosforilación y activación de la NADPH oxidasa, aumentando la generación de ERO. El factor NFkb es activado por ERO, translocandose al núcleo e induciendo trascripción de citoquinas proinflamatorias. Nos propusimos investigar el efecto de tres ácidos grasos sobre el estallido respiratorio de monocitos. Células THP-1 y monocitos frescos (Mo) provenientes de individuos control fueron incubados con concentraciones crecientes de acido palmitico (saturado), oleico (monoinsaturado) y linoleico (poliinsaturado) durante 60 minutos a 37ºC. La producción de ERO fue medida mediante citometría de flujo utilizando diclorofluoresceina diacetato (DCFH-DA) como marcador fluorescente. El índice de estimulación (IE) se definió como: Intensidad Media de Fluorescencia (IMF) Células estimuladas/IMF Células Basal. Los datos fueron analizados mediante el test de ANOVA seguido del test T de Student. La respuesta de las células THP-1 fue diferente entre los ácidos grasos en células incubadas con las tres concentraciones estudiadas (200uM; p=0, 0016,400uM; p=0,0450 y 500uM; p=0,0012). El análisis post test revelo diferencias significativas en los IE en respuesta a ácido linoleico y palmítico comparado con acido oleico en los tres casos. Los Mo mostraron una respuesta similar a la observada por la línea celular THP-1. Concluimos que los ácidos palmitico y linoleico estimulan el estallido respiratorio en monocitos humanos. Esta exagerada producción de ERO refleja un potencial riesgo de daño tisular en pacientes con elevados niveles de ácidos grasos plasmáticos, como los pacientes con EHNA, efecto que debe ser estudiado detalladamente