AVANCES EN LA CARACTERIZACIÓN DE VIRULENCIA DE CEPAS DE FLAVOBACTERIUM PSYCHROPHILUM AISLADAS DE SALMÓNIDOS DE PISCICULTURAS DE RÍO NEGRO Y NEUQUÉN

PABLO MORENO; VIRGINIA ANGÉLICA BIANCHI; JUAN MANUEL CASTRO; ROMANELA MARCELLINO; LEONARDO MOLINARI

Jornada; I Jornadas Latinoamericanas Una Salud | Una Acuicultura; 2024

Flavobacterium psychrophilum es el agente etiológico de la “enfermedad bacteriana del agua fría” o “flavobacteriosis”, una enfermedad que causa mortalidades significativas en pisciculturas de la región norpatagónica. La identificación específica y determinación de la virulencia de las cepas involucradas en estos eventos resulta relevante en orden de definir acciones de manejo o tratamientos terapéuticos que minimicen su impacto. En este trabajo se muestran los resultados obtenidos a partir del muestreo de salmónidos provenientes de pisciculturas de Río Negro y Neuquén realizados entre 2014 y 2024, donde empleamos distintas metodologías para determinar la virulencia de las cepas de F. psychrophilum aisladas. Los aislamientos bacterianos se realizaron mediante la siembra de muestras de riñón en medio agar FLP o TYES de peces moribundos que presentaban necrosis dérmica y/o erosión de aletas y opérculos (incubación a 15°C por 10 días). Las colonias que presentaron morfología y Gram compatible con F. psychrophilum fueron identificadas por PCR mediante la utilización de los pares de primers FP1-FP3 y fpPPIC1F-fpPPIC1R. Posteriormente, se determinó por PCR la presencia de los alelos CFS 295-93 (virulento) y ATCC 49418T (avirulento) del gen del 16SrRNA. 41 aislados fueron confirmados como F. psychrophilum, de ese total se analizaron hasta el momento 13 cepas para la determinación de virulencia: 10 de estas presentaron sólo el alelo virulento mientras que 3 presentaron ambos alelos (virulencia moderada). Para algunas cepas, se evaluó la concentración mínima con efecto observable de actividad colagenasa por hidrólisis de gelatina al 4% en agar FLP. Se observó capacidad de hidrólisis a concentraciones de 104 y 105 UFC/mL. Finalmente, se seleccionó una cepa con virulencia moderada y se evaluaron las condiciones óptimas para su utilización en ensayos de virulencia in vivo. Los mayores porcentajes de mortalidad acumulada se obtuvieron cuando la bacteria fue resuspendida en PBS e inyectada intramuscularmente, con previa activación por infección experimental y reaislamiento en pez. Además, la supervivencia de los salmónidos varió con la especie y se incrementó con la talla. Este tipo de información resulta valiosa en términos de vigilancia sanitaria, análisis de susceptibilidad a antimicrobianos o para el potencial desarrollo de vacunas. Los resultados presentados son base para la consolidación de un proyecto de colaboración entre el CEAN, LEA (INIBIOMA, CONICET) e INTA (Bariloche) para el estudio de aspectos epidemiológicos de la flavobacteriosis en centros de cría de trucha arcoíris de Río Negro y Neuquén. Esperamos obtener información sobre la distribución, impacto y características de F. psychrophilum que permitan sugerir prácticas y herramientas sanitarias de prevención y control de la flavobacteriosis en centros de producción acuícola.