EFECTO DEL ACTIVADOR DE PLASMINÓGENO TIPO UROQUINASA EN LA PROLIFERACIÓN DE CÉLULAS EPITELIALES DEL OVIDUCTO BOVINO

GARCIA, DANIELA CELESTE; ROLDÁN-OLARTE M; RUSSO MAENZA, A; MICELI, DC

Horco Molle

Jornada; XXXI Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2014

Asociación de Biología de Tucumán

El plasminógeno es una molécula que se transforma en una enzima activa, la plasmina, que es clave en los procesos de remodelación extracelular. El activador de plasminógeno tipo uroquinasa (uPA) no sólo permite su activación sino que también se une a su receptor, uPAR, que está anclado a la membrana plasmática. Esta interacción localiza la actividad proteolítica en las proximidades de las células y activa vías de señalización intracelulares. Previamente se ha estudiado la localización y expresión de uPAR en el oviducto bovino. También se determinó que cultivos oviductales bovinos inducidos con uPA presentan mayores niveles de fosforilación de proteínas de la vía MAPK y aumento en la expresión de factores transcripcionales. En este trabajo se propone analizar si la adición de uPA a cultivos de epitelio oviductal bovino afecta la proliferación celular, mediante el estudio de la ciclina D1. Esta molécula es una proteína que permite el progreso de la etapa G1 del ciclo celular. Para ello se obtuvieron células epiteliales de oviductos de vacas en diestro. Luego se cultivaron las células y se estimularon con 10 nM de uPA. Además se realizaron controles sin adición de uPA. Algunos cultivos fueron tratados previamente a la inducción con 0,4 µg/ml de anticuerpo anti-uPAR, para neutralizar dicho efecto. Se extrajo el ARN total, se sintetizó el ADNc y se analizó la expresión mediante RT-PCR en tiempo real. Las proporciones relativas de los niveles de ARNm se normalizaron con el gen de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa. Se observó que en cultivos inducidos con uPA, la expresión de ciclina D1 aumentaba respecto a los controles. Los cultivos que fueron sometidos al tratamiento de anticuerpo y posterior adición de uPA presentaron un nivel de expresión menor. Mediante los resultados obtenidos se puede concluir que uPA regula la proliferación celular en el oviducto bovino a través de la unión a su receptor, activando vías de señales intracelulares y estimulando la expresión de genes, como ciclina D1. De esta manera, uPA podría estar implicada en los cambios oviductales favoreciendo el microambiente necesario para la fecundación y desarrollo embrionario temprano.