§ Caracterización de sistemas de transporte de membrana de macrófagos alveolares en un modelo de asma murino

CHIURAZZI, R ; ROMERO, Y; FENOY, I; AMORENA, C ; GOLDMAN, A

Congreso; Reunión Anual SAIC; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los macrófagos alveolares (MA) juegan un rol significativo en la inflamación alérgica (IA). Los canales iónicos son importantes para, la funcionalidad de los macrófagos. Kv1.3 es el subtipo expresado en linfocitos T, B y macrófagos. Hemos detectado previamente en MA de ratones con IA pulmonar, la presencia de corrientes típicamente “outward rectifier” con un potencial de equilibrio de -80 mV, característico de un canal de K+. El mismo tipo de corriente se observó en animales normales. Los MA de  animales acon IA mostraron un aumento en la superficie celular medido por capacitancia. El bloqueo del canal de K+ con caribdotoxina y la despolarización con alto K+ inhibieron la producción de ROS, en los MA de animales con IA. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la expresión transcripcional del canal Kv1.3 y obtener así una descripción más completa de los sistemas de transporte de la membrana celular de estos MA. Ratones BALB/c se sensibilizaron (ip) y  desafiaron con OVA (vía aérea). Determinamos, por citometría de flujo que los MA de animales con IA poseen mayor superficie celular (coincidiendo con mediciones de capacitancia) y mayor granulosidad respecto de los normales. La expresión transcripcional del canal Kv1.3, medida por qPCR, fue menor en los animales con IA tanto en condiciones en la que se normalizó por GAPDH (unidades relativas, IA: 0,58 ± 0,14 vs normales: 1,30 ± 0,42, p<0.05) como cuando se midió en base a la cantidad absoluta de mRNA (en función del Ct, IA: 20.87 ± 0,19 vs normales: 19,74 ± 0,26, p<0.05). Se realizó el análisis con ambos métodos ya que la normalización con GADPH ha sido cuestionada. En vista de la relación que existe entre la generación de ROS y la actividad de la Na-K ATPasa, la que esta vinculada a canales de K, proponemos que la regulación de sistemas de transporte se encuentra afectada en los MA de animales con IA y que el aumento de ROS estaría implicado en esas modificaciones.