ANÁLISIS DE MUTACIONES INACTIVANTES EN EL GEN DE LA TIROGLOBULINA HUMANA Y SUS EFECTOS SOBRE LOS DOMINIOS FUNCIONALES.

CINTIA E. CITTERIO; GLORIA A. MACHIAVELLI; FIORELLA S. BELFORTE; MARÍA C. OLCESE; CARINA M. RIVOLTA; HÉCTOR M. TARGOVNIK

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica - SAIC - SAFIS - AACYTAL 2011; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

La biosíntesis de las hormonas tiroideas requiere la integridad de un sistema complejo de proteínas dependientes de la estructura tridimensional de la tiroglobulina (TG). La TG es codificada por un gen de 270 Kb que comprende 48 exones. El monómero contiene 2768 residuos y se compone de cuatro regiones funcionales y estructurales. El amino-terminal y la parte media contienen tres tipos de motivos repetitivos, organizados en tres regiones: I, II y III. La cuarta región se encuentra en el carboxilo-terminal y contiene un dominio no repetitivo que muestra una homología con la acetilcolinesterasa (ACHE-like domain). Los objetivos del presente trabajo fueron: a) Identificar nuevas mutaciones inactivantes en el gen de la TG; b) Predecir el impacto de sustituciones aminoacídicas en la estructura y 3) Construir minigenes para el análisis funcional de las variaciones de secuencia en sitios consenso de splicing. Se identificaron diecisiete mutaciones no descriptas: exón 4 (p.Y107X), g.IVS6+1G>A, exón 10 (p.Q717X, p.R768X, p.R893fsX946), exón 17 (p.S1203L, p.R1251C, p.I1244fsX1246, p.C1262Y), g.IVS19+3_+4delAT, exón 27 (p.Q1777X), exón 28 (p.K1803fsX1833), exón 33 (p.C1981W, del exón 33), exón 38 (p.P2183R), exón 40 (p.R2317X), exón 48 (del exón 48). Se caracterizaron sitios crípticos de splicing en los intrones 6 y 19 que son activados cuando los auténticos sitios están mutados (g.IVS6+1G>A, g.IVS19+3_+4delAT). Factores específicos de secuencia y factores genéticos celulares contribuyen al uso diferencial de estos sitios crípticos. Una extensa deleción fue localizada en el último exón de la TG que se extiende a la región intergénica. Finalmente, se correlacionó funcionalmente la localización de las mutaciones con las cuatro regiones del monómero. En conclusión, los efectos más importantes de las mutaciones en el gen de TG originan cambios conformacionales que eliminan sitios hormonogénicos, activan sitios crípticos de splicing y afectan su transporte intracelular.