IIBIO   27936
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOTECNOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de la localización intracelular de las GTPasas pequeñas Rab1 y Rab5a en Trypanosoma cruzi
Autor/es:
DIPP, FLORENCIA; MUCCI, JUAN; SCHIOPETTO, MARCOS; CÁMARA, MARÍA DE LOS MILAGROS; PARADA PUIG, RAQUEL
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; XXXIV REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE PROTOZOOLOGÍA; 2023
Institución organizadora:
Universidad Nacional de La Plata
Resumen:
Trypanosoma cruzi es agente causal de laenfermedad de Chagas. Este parásito poseevarias proteínas de membrana que son críticaspara el proceso infeccioso, sin embargo sutráfico intracelular está poco estudiado. Estetráfico se encuentra mediado por proteínas detipo Rab GTPasas, las cuales desempeñan unpapel crucial en procesos como la gemación devesículas, su transporte, anclaje y unión a lasmembranas. En estudios previos hemosdemostrado que la Rab11, que se encuentralocalizada en la vacuola contráctil, juega unpapel en el tráfico de factores de virulenciaimportantes, como la trans-sialidasa. Adiferencia de otros organismos eucariotas queposeen más de 70 proteínas tipo Rab condiversas funciones, en T. cruzi se haidentificado un número considerablementemenor, y muchas de estas proteínas aún no seconoce su localización subcelular o su función.En esta línea de estudio, nos enfocamos en lalocalización de las proteínas Rab1 y Rab5a,cuya ubicación intracelular es desconocida enT. cruzi. Mediante una búsquedabioinformática, los genes de ambas proteínasfueros identificados y se alinearon con susrespectivos ortólogos de T. brucei yLeishmania. Posteriormente, clonamos ytransfectamos ambos genes en la cepa SylvioX10 utilizando el vector pTEX para generar lasproteínas de fusión GFP-Rab1 y HA-Rab5a, ydeterminamos su localización subcelularmediante microscopía de inmunofluorescencia.En el caso de la GTPasa Rab1 observamos quese localiza en el aparato de Golgi dada sucolocalización con la proteína marcadoraGRASP, entretanto la proteína Rab5a mostróuna localización particular, distinta a laobservada para proteínas residentes delaparato de Golgi, la vacuola contráctil oreservosomas. Sin embargo, hemos observadouna asociación con el retículo endoplasmáticopor estudios de colocalización con la proteínamarcadora calreticulina. La caracterización deeste tipo de proteínas abre una nueva gama deblancos para tratamientos para estaenfermedad.