INTECH   27907
INSTITUTO TECNOLOGICO DE CHASCOMUS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de un test de determinación de paternidad y parentesco para pejerrey Odontesthes bonariensis utilizando marcadores microsatélites.
Autor/es:
ROMÁN SAPINO; LEANDRO A. MIRANDA; SILVIA E. ARRANZ; JUAN DÍAZ; GUSTAVO M. SOMOZA; MARIANO FAGGIANI; GABRIELA V. VILLANOVA
Lugar:
Piriápolis
Reunión:
Congreso; VI Conferencia Latinoamericana sobre Cultivo de Peces Nativos.; 2018
Resumen:
El pejerrey Odontesthes bonariensis es una especie nativa ampliamente distribuida en aguas continentales de la región central de Argentina, y ha sido dispersado a otros países del mundo. Es una especie emblemática de las pesquerías recreativas y deportivas del centro y norte del país, generando una actividad económica muy importante. Su piscicultura data de varias décadas, principalmente dedicada a la producción de huevos o larvas para la siembra en cuerpos de agua donde se promueve la pesca deportiva como actividad turística. A pesar de la importancia de esta especie, la información sobre la diversidad genética de sus poblaciones, que sirva para la mejora de su producción o para evaluar el impacto de las siembras, es escasa. La presencia de diversidad genética en una población es necesaria para que esa población pueda sobrellevar los cambios ambientales, así como también es la base de los procesos evolutivos. Las reproducciones de pejerrey con fines de siembra se realizan sin conocer el grado de parentesco de los reproductores a ser utilizados y tampoco se evalúan las características de la población donde serán introducidos. En este trabajo se propone el desarrollo de un test de determinación de paternidad y parentesco para pejerrey basado en dos reacciones de PCR multiplex utilizando marcadores microsatélites. Para ello, se pre-seleccionaron 13 marcadores microsatélites descriptos en la bibliografía. Las reacciones de PCR para cada locus fueron estandarizadas en el laboratorio utilizando ADN proveniente de 2 individuos, Luego 11 de los 13 marcadores fueron caracterizados en una población silvestre (N=20). Los productos de amplificación obtenidos para cada marcador fueron resueltos en geles de poliacrilamida teñidos con plata. Para cada locus se determinó el número de alelos (Na), heterocigocidad observada (Ho) y esperada (He), frecuencia de alelos nulos (Fnull), contenidos de información polimórfica (PIC), y probabilidad de exclusión (PE). El Na totales fue 91, y varió por locus entre 4 y 14, la He varió entre 0,561 y 0.903, la Ho varió entre 0 y 0.889, y el PIC varió entre 0.514 y 0,869. Siete de los loci presentaron Fnull < 10%. Teniendo en cuenta estos parámetros, se seleccionaron los 7 loci que presentaron un potencial de exclusión acumulado mayor a 99 % (Pexc acum1=0,992). Éstos fueron combinados en dos PCR multiplex M1 y M2 de acuerdo a los tamaños de los fragmentos de amplificación. Los cebadores se marcaron fluorescentemente y se evaluaron las condiciones de co-amplificación para cada multiplex. Luego, M1 y M2 se usaron para genotipar 3 familias (padre, madre y progenie. N total=96) con el fin de validar la segregación mendeliana, el desequilibrio de ligamiento y la presencia de alelos nulos de los marcadores. Esta herramienta permitirá evaluar la diversidad genética y el grado de parentesco existente entre los reproductores de los centros de cultivo, clasificarlos de acuerdo a ello y diseñar las cruzas para evitar la endogamia y la disminución de diversidad genética en las poblaciones de pejerrey en los ambientes donde se realicen las siembras.